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苦参生物碱的提取实验报告

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苦参生物碱的提取实验报告

篇一:苦参生物碱的提取分离与鉴定最终版 实验五苦参生物碱的提取分离与鉴定

苦参是豆科槐属植物苦参的干燥根,含有多种生物碱,总碱含量高达约1%,其中以苦参碱、氧化苦参碱含量最高。苦参碱可溶于水、乙醚、三氯甲烷、苯,难溶于石油醚。氧化苦参碱为白色柱状结晶,可溶于水、三氯甲烷、乙醇‘难溶于乙醚、石油醚。现代药理学研究表明,苦参中的生物碱具有消肿利尿、抗肿瘤和抗心律失常的作用。 一、实验目的

本实验通过从苦参中提取苦参生物碱,考察盐酸的浓度和渗漉速度对提取产率的影响

了解化学反应萃取分离在天然药物提取过程中的应用 掌握渗漉法和离子交换提取生物碱的原理、方法与工艺过程,并熟悉用柱层析法分离生物碱。

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二、实验内容

(1)苦参总碱的提取。

①将苦参粗粉用不同浓度的hcl溶液润湿后渗漉,收集渗漉液;②将收集的渗漉液通过阳离子交换树脂柱,进行离子交换;

③洗脱并回流提取苦参总碱。

(2)分别用柱层析法和溶解度差异法分离氧化苦参碱。 三、实验时间 步骤所需时间/h 渗漉2 离子交换2 回流5

柱层析(或溶解度差异法) 2.5 鉴定0.5 四、实验原理 1.提取与分离方法

利用苦参生物碱具有弱碱性,可与强酸结合成易溶于水的盐的性质,将总碱从药材中提取出来。结合动态连接提取工艺过程,实现生物碱充分溶出。然后,加碱碱化,即可得到苦参生物总碱。以苦参碱为例: 2.工艺流程

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五、实验材料与设备 1.实验设备与仪器

层析柱,渗漉桶,烧杯,布氏漏斗,医用搪瓷盘,恒温水浴箱,层析槽,索氏提取器,研钵。 2.实验材料与试剂

苦参,强酸性阳离子树脂,层析用氧化铝,三氯甲烷,甲醇,浓氨水,乙醚,碘化铋钾,盐酸,氢氧化钠。 碘-碘化钾试剂,碘化汞钾试剂,碘化铋钾试剂,硅钨酸试剂。

六、实验步骤 1.反应提取步骤 (1)动态连续提取

①取苦参粗粉200g加一定浓度的盐酸,拌匀,放置30min,使生药膨胀。②然后装入渗漉桶中,边加边压,层层加紧,全部装完后,药面压平,盖一层滤纸,滤纸上压一些洗净的玻璃塞。

③加入一定浓度的hcl溶液经过药面,以4~5mL/min的速度渗漉,收集渗漉液至无明显的生物碱反应为止,收集渗漉液约2500mL。 (2)交换

①将收集的渗漉液置于阳离子交换树脂进行交换,如交换液有为交换的生物碱时,仍可以继续交换,直至流出液无

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生物碱反应为止。

②将树脂倾入烧杯中,用蒸馏水洗涤数次,除去杂质,于布氏漏斗中抽干,倒入唐磁盘中晾干。 (3)总生物碱的洗脱

①将晾干的树脂,加浓氨水适量,搅匀,使湿润度适宜,树脂充分膨胀,盖好放置20min。

②装入索氏提取器中,加三氯甲烷300mL在水浴上回流洗脱,提至尽生物碱为止。

③回收三氯甲烷,得棕色粘稠物。

④加无水丙酮适量,加热溶解,过滤,减压蒸干。 必要时重复此操作,以脱除粗生物碱中的水,再在无水丙酮中重结晶。 2.氧化苦参的分离

(1)柱色谱法取100目色谱用氧化铝50g,用漏斗缓慢加入色谱柱内(1cm×24cm,干法装柱),取苦参0.2g,加入适量氧化铝,搅匀,研细,装入色谱柱顶端,先用50ml三氯甲烷通过色谱柱,再用三氯甲烷-甲醇(9:1)洗脱,流速 为1mL/min。每10mL为一份(约收集15份),经薄层层色谱鉴定,相同流出成分合并,在水浴上挥发去溶剂,剩余物加无水丙酮溶解,放置,析出结晶为氧化苦参碱。 (2)溶解度差异法将苦参总碱溶于少量三氯甲烷中,加入10倍量乙醚,放置后有沉淀析出,过滤吸出的沉淀,

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滤液浓缩后再溶于少量三氯甲烷中,加入乙醚放置,再过滤析出沉淀,合并两次的沉淀物,用丙酮重结晶,即为氧化苦参碱。

(3)实验要求上述本工艺实验的操作步骤为典型实例,实验过程要求改变盐酸浓度以及渗漉速度,其余条件不变,在进行本实验时有两组同学做同一组浓度,但渗漉速度不同,以此比较不同盐酸浓度、不同渗漉速度下的提取率差异。 3.薄层色谱鉴定

样品:苦参总碱、氧化苦参碱、苦参碱标准品、氧化苦参碱标准品

(1)吸附剂:硅胶g;展开剂:三氯甲烷-甲醇-浓氨水(5:0.6:0.2);

(2)吸附剂:氧化铝;展开剂:三氯甲烷-甲醇-乙醚(44:0.6:3);

(3)显色剂:改良碘化铋钾。 4.沉淀试验

取苦参总碱少许溶于稀盐酸中,分置4个小试管中,分别滴加下列试剂1~2滴,观察现象:

碘-碘化钾试剂碘化汞钾试剂碘化铋钾试剂硅钨酸试剂 七、注意事项

(1)浓盐酸、氨水均具有刺激性,使用时注意通风。 (2)丙酮、三氯甲烷、甲醇、无水乙醇和乙醚均为易

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燃品,注意防火安全。

(3)在将药材装柱时,不要将药材塞得过紧或过松。过紧,渗漉速度太慢;过松,渗漉速度太快,达不到渗漉效果。

八、实验报告内容

2、在收集渗漉液的过程中,溶液的颜色有何变化?在回流提取中,有何现象发生?

答:渗滤液的颜色刚开始为深棕黄色,随着渗漉时间的增加颜色慢慢变浅在回流过程中,树脂颜色慢慢变浅,溶液颜色逐渐加深。

3、.薄层色谱的结果如何?

答:因为所用盐酸浓度太低才2%,所能提取到的样品太少了,所以层析跑出来是没有东西的。

4、.实验报告除了完成单组实验内容和结果讨论外,还必须结合所有实验结果绘制出产品收率与盐酸浓度的关系曲线,并进行工艺分析讨论。

答:因为前几组用的盐酸浓度都很低,没有结果,所以产品收率与盐酸浓度的关系曲线没办法绘制。

由此实验可见,盐酸的浓度对苦参提取的影响之大。 九、参考文献

1肖崇厚主编·中药化学·上海:上海科技出版社,1997 2杨其蕴主编·天然药物化学·中国医药出版社,1995

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3章育中等·苦参及其制剂中生物碱的薄层分离和含量测定·药学学报·1981,16(4):274~276 九、思考题

1干法装柱与湿法装柱有何区别? 答:湿法装柱

先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂“走柱子”,本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。 干法装柱

直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结 篇二:实验三苦参生物碱的提取与鉴识 实验三苦参生物碱的提取与鉴识 背景

1.1苦参的化学成分

苦参,又名苦骨(见《本草纲目》川)、川参(见《贵州民间方药集》、凤凰爪(见翌广西中兽医药植))、牛参(见《湖南药物志》),陶宏景谓:“叶极似槐叶,花黄色,子作荚,根味至苦恶。”李时珍谓:“苦以味名,参以功名。”lz]始载于((神农本草经》,列为中品。为豆科(Leg姗zn口sae)植物苦参(£叩加rafla。escensAzt.)的干燥根。分布于我国南北各

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地Is],春秋两季采挖,除去根头及小支根,洗净,干燥、或趁鲜切片,干燥。苦参性味苦寒,归心、肝、胃、大肠、膀肤经。功能清热燥湿、祛风杀虫、利尿通淋。用于热痢、便血、黄疽尿闭、赤白带下、阴肿阴痒、湿疹、湿疮、皮肤癌痒、疥癣麻风等诸多病症。

苦参中含有多种有效成分,目前已知的主要有生物碱类、黄酮类、挥发油类化合物,还含有少量醒类、皂试类及氨基酸等其它化合物。下面分别介绍各类化合物的主要成分。 1.LI生物碱

国内外学者从苦参根、苦参茎和叶及其花【4一l0]分离出26种生物碱。苦参生物碱大多数是哇诺里西咤类(quinolizidine一type),极少数为双呱陡类

(dipiperidine--type)。喳诺里西陡生物碱多数为苦参碱型生物碱,另有两种金雀花碱型(eytisine一type)生物碱,两种无叶豆碱型(sparteine一type)生物碱,一种羽扇豆碱型(lupinine一type)生物碱。包括苦参碱(matrine),氧化苦参碱(oxymatrine),槐果碱(sophoearpine)、氧化槐果碱(n一oxysophoearpine)、异槐果碱(isosoph。carpine)、异苦参碱(isomatrine)、7,11一去氢苦参碱(7,11一dehydromatrine)、槐胺碱(sophoramine)、异槐胺碱(isosophoramine)、新槐胺碱(neosophoramine)、■3一去氢槐胺碱(■`3一dehydrosophoramine)、■`一去氢槐胺碱

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(■7-dehydrosophoramine)、槐醇(sophoranol),9。一经基槐胺碱(9。一hydroxysophoramine)、5。,9。一二轻基苦参碱(5。,ga一dehydroxymatrine)、氧化槐醇(sophoranoln一oxide)、雀花碱(lupanine)、臭豆碱(anagyrine)、膺靛叶碱(baptifoline)、mamanine,Kuraramine、1sokuraramine等。

1.1.2黄酮类化合物

从苦参根和狭叶苦参根分离的黄酮类化合物己有29种[ll,2],多数为二氢黄酮和二氢黄酮醇类,少数为黄酮类、异黄酮类、查耳酮类和紫檀素类,其中仅有两种化合物为试,取代基除了常见的轻基、甲氧基外,多数化合物还具有异戊烯基(取代基A

1.1.3挥发油成分

王秀坤等!`4】对苦参中的挥发油成分进行了分析,采用苦参粗粉与水共蒸馏,乙醚处理,无水硫酸钠脱水干燥,回收乙醚得油状物,再经气相色谱、质谱分析,共鉴定出47个成分。鉴定出的化合物以二十烷烃为主成分,占58.12%。就结构类型看,以烯烃为主,其次为烷烃和醇类,尚含酸醛酮酚等。 1.1.4其它类型的化合物

从苦参根中还分离得到一系列2一烷基色酮的衍生物I`5]、一种醒类化合物和两种三砧皂试l`6】。王秀坤等llvl对苦参中的游离氨基酸成分进行了分析与鉴定,鉴定出巧种

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氨基酸,并计算了各成分的含量。发现苦参中总游离氨基酸含量为162.51mg/l00ml,其中含量最高的为脯氨

酸,107.51mg/l00ml,其次为天冬氨酸29.mg/100ml。张俊华等I`s]用色谱等方法分离,波谱等方法鉴定苦参中化学成分结构,分离得到5个化合物,分别为蔗糖、二十四碳酸、日一谷肖醇、芥子酸十六酷,伞形花内酷,均为首次从苦参中获得,其中芥子酸十六酷为新化合物。 一.实验目的

1.本实验通过从苦参中提取苦参生物碱,考察盐酸的浓度和渗漉速度对提取产率的影响

2.了解化学反应萃取分离在天然药物提取过程中的应用

掌握渗漉法和离子交换提取生物碱的原理、方法与工艺过程,并熟悉用柱层析法分离生物碱。 二.实验原理

利用苦参生物碱具有弱碱性,可与强酸结合成易溶于水的盐的性质,将总碱从药材中提取出来。结合动态连接提取工艺过程,实现生物碱充分溶出。然后,加碱碱化,即可得到苦参生物总碱。

渗滚法(percolation)的提取过程类似多次浸取过程,浸出液可以达到较高浓度,浸出效较好。此法常温操作不需加热,溶剂用量少,过滤要求较低,使分离操作过程简化,尤

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其适用于热敏性、易挥发且有效成分含量较低或贵重药材提取。采用0.5%的硫酸溶液对中药材黄连用渗辘法提取,收集7倍量渗媲液即可保证生物碱的提取率,与回流法比较,渗辘法提取物含杂质少、提取率高、使用溶剂量少即l。渗渡法的操作技术要求较高,否则会影响提取效率,当提取物为薪性、不易流动的成分时,不宜使用该法。 三.实验流程

鉴识:定性反应.薄层色谱等 四.实验过程

1.离子交换树脂的预处理

将70g聚苯乙烯磺酸型树脂(交联度3%),放入烧杯中,加200ml80℃的蒸馏水溶胀

30分钟,倾出蒸馏水后加入2mol/L盐酸300ml,充分搅拌,放置半小时(静态转型),后装入树脂柱(2cm×100cm),并使全部酸水溶液通过树脂柱(动态转型),流出液的速度以液滴不成串为宜。后用蒸馏水洗至中性,待用。注意从装柱到洗涤过程中始终保持液面高于树脂床。 2.总生物碱的提取和分离 (1)动态连续提取

①取苦参粗粉200g加一定浓度的盐酸,拌匀,放置30min,使生药膨胀。

②然后装入渗漉桶中,边加边压,层层加紧,全部装完

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后,药面压平,盖一层滤纸,滤纸上压一些洗净的玻璃塞。 ③加入一定浓度的hcl溶液经过药面,以4~5mL/min的速度渗漉,收集渗漉液至无明显的生物碱反应为止,收集渗漉液约2500mL。 (2)交换

①将收集的渗漉液置于阳离子交换树脂进行交换,如交换液有为交换的生物碱时,仍可以继续交换,直至流出液无生物碱反应为止。

②将树脂倾入烧杯中,用蒸馏水洗涤数次,除去杂质,于布氏漏斗中抽干,倒入唐磁盘中晾干。 (3)总生物碱的洗脱

①将晾干的树脂,加浓氨水适量,搅匀,使湿润度适宜,树脂充分膨胀,盖好放置20min。②装入索氏提取器中,加三氯甲烷300mL在水浴上回流洗脱,提至尽生物碱为止。③回收三氯甲烷,得棕色粘稠物。

④加无水丙酮适量,加热溶解,过滤,减压蒸干。 必要时重复此操作,以脱除粗生物碱中的水,再在无水丙酮中重结晶。

3.氧化苦参碱的分离

(1)柱色谱法取100目色谱用氧化铝50g,用漏斗缓慢加入色谱柱内(1cm×24cm,干法装柱),取苦参0.2g,加入适量氧化铝,搅匀,研细,装入色谱柱顶端,先用50ml三

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氯甲烷通过色谱柱,再用三氯甲烷-甲醇(9:1)洗脱,流速为1mL/min。每10mL为一份(约收集15份),经薄层层色谱鉴定,相同流出成分合并,在水浴上挥发去溶剂,剩余物加无水丙酮溶解,放置,析出结晶为氧化苦参碱。 (2)溶解度差异法将苦参总碱溶于少量三氯甲烷中,加入10倍量乙醚,放置后有沉淀析出,过滤吸出的沉淀,滤液浓缩后再溶于少量三氯甲烷中,加入乙醚放置,再过滤析出沉淀,合并两次的沉淀物,用丙酮重结晶,即为氧化苦参碱。

4.苦参生物碱的沉淀反应

取自制苦参总生物碱约0.1g加1%盐10ml使溶解,过滤,取滤液分置于三支试管中,进行以下试验:

(1)碘化铋钾试验:于上述一支试管中加入碘化铋钾试剂1~2滴,立即有桔红色沉淀产生.

(2)碘化汞钾试验:于上述另一支试管中加入碘化汞钾试剂2~3滴,有白色沉淀产生.

(3)碘-碘化钾试验:于上述第三支试管中加入碘一碘化钾试剂2~3滴,有褐色或棕褐色沉淀产生. 5.苦参生物碱的薄层层析鉴定 (1)氧化铝薄层层析法

吸附剂:中性氧化铝(Ⅱ级,过160目筛),干法铺板(软板).样品:

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a.自制苦参碱乙醇溶液; b.苦参碱标准品乙醇溶液; c.自制氧化苦参碱乙醇溶液; d.氧化苦参碱标准品乙醇溶液; e.自制苦参总生物碱乙醇溶液 展开剂:

①氯仿-甲醇(19:1)展开三次; ②氯仿-甲醇-浓氨水(5:0.6:0.2)

显色剂:喷雾改良碘化铋钾试剂,观察斑点颜色,并与标准品对照

(2)硅胶薄层层析法

吸附剂:2%氢氧化钠溶液制备的硅胶g硬板,于110℃烘干半小时.

样品:同(1)项下 展开剂:

a.先以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(2:4:2:1)展开,展距约8cm,取出,晾干,再以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(20:20:3:1)展开,展距第一次相同; b.氯仿-甲醇-乙醚(44:0.6:3)

显色剂:喷雾改良碘化铋钾试剂和亚钠乙醇液,观察斑点颜色,并与标准品对照 五.思考题

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1.叙述酸水法及离子交换法提取纯化生物碱的原理。 2.应如何检查

(1)渗漉液中是否含有生物碱?

(2)渗漉液中生物碱是否被交换在树脂上? (3)离子交换树脂是否已饱和? 3.简述索氏提取器提取原理及特点。

4.在收集渗漉液的过程中,溶液的颜色有何变化?在回流提取中,有何现象发生?

5.制备性薄层色谱的特点是什么? 六.主要参考文献

1.胡晶红,苦参生物碱的提取和氧化苦参碱的纯化,山东大学硕士学位论文,20XX

2.A.uenoetal.chem.pharm.bull.1978,26,1832 3.陈德昌.中药化学对照品工作手册.北京:中国医药科技出版社,2000:142

4.杨云等.天然药物化学成分提取分离手册.北京:中国中医药出版社,20XX:454 篇三:苦参生物碱的提取与分离

苦参生物碱的提取与分离张婷婷制药2班10131040229 0引言

苦参又名苦骨、川参、凤凰爪、牛参、地槐、野槐等,为豆科多年生落叶亚灌木植物舌参根,采挖后去芦头及须根

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晒干切片入药,全国各地均产,功能主要为清热、燥湿、杀虫等,主治热毒血痢、肠风下血、黄疸、赤白带下、小儿肺炎、急性扁桃体炎等多种炎症和痔漏、疥癞恶疮、皮肤瘙痒、阴疮湿痒等疾病研究得知,苦参的根含有多种生物碱,如氧化苦参碱、羟基苦参碱、甲基野靛碱、臭豆碱、赝靛叶碱、脱氢苦参碱(槐果碱)等多种生物碱及黄酮类化合物因为苦参碱具有多方面的药理作用,如抗肿瘤作用、抗癌作用、抗病毒作用,所以对苦参总碱的提取与分离具有重要的意义苦参总碱的提取方法相对较多,本文中主要侧重论述苦参提取水煎法。

1苦参碱以及其化学结构 1.1苦参碱的基本性质

苦参碱系指从豆科植物苦参、苦豆子、山豆根中分离出来的生物碱,是上述3种传统中草的主要活性成分之一,是苦参类生物碱的代表.《中国药典》20XX年版一部中,是以苦参碱的含量作为苦参药材的质量控制指标[1];20XX年版一部中,苦参碱

一.的含量也是苦参药材的质量控制指标之 1.2苦参碱的化学结构

苦参碱是白金雀儿碱的异构体,属于喹喏里西啶类衍生物,由2个喹喏里西啶环骈合而成,有2个氮原子,一个是叔胺氮,一个是酰胺氮,其分子式为c15h24n2o,分子量为

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245.37.苦参碱有4种

0形态:α-苦参碱为针状或柱状结晶,熔点为76c;β-苦参碱为

00斜方晶状,熔点为87c;γ-苦参碱为液体,沸点为223cδ-苦

0参碱是柱状结晶,熔点为84常用的是α-苦参碱,其结构见图1.

苦参碱能溶于水、苯、氯仿、甲醇、乙醇,微溶于石油醚。图一α-苦参生物碱的结构图[2] 2.苦参类生物碱的药理作用

近年来发现苦参碱类生物碱在保护中枢神经系统和心血统、抗病毒、抗炎、免疫抑制及抗肿瘤等方面有重要的药理活性和应 [4]用前途.

2.1苦参碱的抗肿瘤作用

苦参碱类药物对于多种实验性肿瘤均有抑制作用,且多为移

植性实体瘤.苦参碱和氧化苦参碱同是苦参中抗癌有效成分,对癌细胞有直接杀伤作用.电镜观察可见肿瘤细胞呈中等抑制,瘤细胞膜和细胞质有明显改变.此外,苦参碱类药物具有毒性低、无抑制骨髓和机体免疫功能的优点.动物实验表明,氧化苦参碱对s-180有显著抑制作用.日本

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报道它对s-180的治疗指数比丝霉素的治疗指数大7至8倍,临床效果类似于苦参碱.另有发现:苦参碱对p815肿瘤细胞亦有直接毒性作用,能降低p815细胞的3h-TdR掺入值,这从机制上可能说明苦参碱是一种直接细胞代谢抑制剂. 2.1.1对肝癌细胞的作用

一定浓度的苦参碱对hepg2细胞的增生有抑制作用[5],主要为直接杀伤作用,从而影响了hepg2细胞的代谢,使AFp和pcn指数降低,恶性表型消失,肿瘤细胞恶性程度和侵袭力减弱,这说明苦参碱可能成为很好的抗癌药物 2.1.2对胃癌细胞的作用

苦参碱在体外对胃癌细胞具有杀伤作用,且在一定剂量和时间范围内呈明显的量效和时效关系,低分化的胃癌细胞AgT对苦参碱更为敏感,苦参碱对胃癌细胞株的外杀伤作用与其诱导胃癌细胞凋亡有关,将苦参碱作用于胃腺癌细胞sgc-790148h后,胃癌细胞bcl-2表达量显著下降,可以推断出苦参碱对胃癌细胞凋亡的诱导作用可能与其影响bcl-2的表达有关.

2.1.3对肺癌细胞的作用

实验表明,三参冲剂(主要成分为苦参碱和川芎嗪)对肿瘤细胞与内皮细胞的粘附因子有明显抑制作用,并可明显抑制cD44和cD49粘附因子的表达,从而抑制肿瘤细胞与内皮细胞的粘附,还可减轻内皮细胞的通透性,保护内皮细胞

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的完整性,阻断了肿瘤细胞与基质的粘附,从而减少了肿瘤转移的形成.这主要是因为三参冲剂对Tiam-l基因具有一定作用.

2.2对中枢神经系统的作用

研究发现氧化苦参碱、苦参碱等具有解热镇痛等中枢抑制性作用.氧化苦参碱能明显抑制小鼠的自主活动,与水合氯醛等中

枢抑制剂有协同作用,而对苯丙胺等中枢兴奋剂则有拮抗作用.苦参碱、氧化苦参碱对化学刺激和热刺激所致小鼠的疼痛反应均有明显抑制作用.苦参碱腹腔注射或口服均能抑制酵母菌致小鼠直肠升温作用,而此作用不能被阿托品和羟甲丙基麦角酰胺所拮抗,但可被多巴胺受体拮抗剂氟哌啶醇完全拮抗.观察并推测苦参碱的解热功能除了对产热过程的直接作用外,还具有多巴胺能样活性. 2.3对心血管系统的作用

大量研究表明,苦参碱在强心和抗心率失常方面有显著的作用.苦参碱和氧化苦参碱均能对抗乌头碱、哇巴因、氯仿-肾上腺素、氯化钡及冠脉结扎等诱发的动物实验性心率失常,且多为室性心率失常,并且均呈剂量依赖性的正性肌力作用.实验证明,这几种生物碱都可显著增强离体豚鼠右心室乳头状肌收缩力.苦参碱作为潜在的强心药,一般同时具有增强心肌收缩力、减慢心率和拮抗心率失常的有益作用.

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目前临床试用苦参碱和氧化苦参碱,发现对室性期前收缩、频发性期前收缩及阵发性心动过速效果较佳,这说明苦参碱类生物碱在强心和抗心率失常方面有着广阔的前景. 2.4抗病毒、抗炎作用

2.4.1在治疗乙型肝炎中的应用

中药苦参碱治疗肝炎在《本草纲目》中已有记载.中医认为,苦参碱性寒味苦,具有清热利湿、退黄利尿、消炎解毒等作用,可治疗多种疾病.基础实验和临床研究表明,苦参碱具有多方面的药理作用及临床功能:①抑制胶原纤维增生而具有抗纤维化作用,这可能与其阻断pDgF(血小板源生长因子)和TgF-β1(转

[]化生长因子β1)的作用,抑制储脂细胞增生和胶原合成有关6

,苦参碱能够保护肝细胞,尤其是膜性结构,降低丙氨酸氨基转移酶、透明质酸、层黏蛋白水平,还可增加胆汁回流,消退黄疸;②抑制网状内皮系统吞噬功能,具有免疫作用.苦参碱有免疫抑制活性,可抑制巨噬细胞胞浆、胞膜的pKc(蛋白激酶c)的活性,有可能成为一种有效的pKc抑制剂.实验证明苦参碱体内外均可抑制TnF和IL-6的分泌,这可能与其抑制pKc活性有关.由于TnF是肝脏炎症损伤中的重要介质,而对于Lps(细菌脂多糖)诱导的小鼠血清及培养的大鼠库普弗细胞的TnF和IL-6升高,苦参碱都有抑

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制作用,这有可能是其消除肝脏炎症的机制

之一.苦参碱不仅有抗炎、抗肝损伤、改善肝脏微循环、促进肝细胞再生的作用,还有助于胆红素的摄取结合与排泄,起到降酶、退黄(:苦参生物碱的提取实验报告)作用,并有抑制乙肝病毒复制和免疫抑制作用20世纪80年代以来干扰素被公认为有效的抗病毒药物,但其病毒学指

标中hbeAg率约40%,且停药后易复发.干扰素主要通过与靶细胞膜上特异受体结合诱导靶细胞产生抗病毒蛋白,从而破坏病毒的mRnA,抑制病毒复制,但其免疫调节作用弱.而慢性乙型肝炎患者普遍存在免疫紊乱的情况,不利于乙型肝炎病毒的最终清除.苦参碱注射液能提高机体免疫力,有清热利湿、利尿退黄、解毒功能,能改善病理性肝炎症状与体征.干扰素加苦参碱注射液治疗慢性乙型肝炎能起到互补协同作用,能明显提扰素的治疗效果,临床无不良反应,值得推广应用.

2.4.2在治疗病毒型心肌炎中的应用

陈曙霞等发现苦参碱具有独特的抗柯萨基b组病毒(cVb)的显著作用,体内外实验均证实病毒性心肌炎模型小鼠经苦参碱治疗后存活期明显延长,有的完全治愈,心、肝组织无病变发生,脾脏T淋巴细胞亚群及nK细胞活性亦改变.提示苦参碱能抑制

[]Lwb繁殖,而且尚有免疫调节功能8.实验和临床证

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明苦参碱

类生物碱还有多种抗炎作用,其机制不详.已有临床应用苦参碱静脉滴注治疗病毒性心肌炎的报道. 3苦参碱的提取与分离 3.1传统煎煮法对苦参的提取

在苦参中苦参总碱或苦参碱及氧化苦参碱的提取方法中较为常用的有溶剂提取法和离子交换法.笔者在实验中首先采用了传统的煎煮法:将中药苦参粗粉置适宜煎煮器中,加适量水浸没原料,充分浸泡后加热至沸,保持微沸浸出一定时间.此法较简便,而且经煎煮后,药中的大部分成分可被不同程度地提出,因此是提取有效成分特别是药物制剂的基本方法.

3.1.1实验仪器

包括电子天平、旋转蒸发器、电炉、磁力搅拌器、超声波振荡器等. 3.1.2材料

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