Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｄｒｕｇ Ｖｏ１．１３ Ｎｏ．９ ・实验研究・ 川芎嗪对小鼠巨噬细胞ＲＡＷ２６４．７中 肿瘤坏死因子一ｏｃ水平的影响 何雨芳 （太仓市第一人民医院药剂科，江苏苏州２１５４００） 【摘要】目的探究川Ｉ芎嗪（１ｉｇｕｓｔｒａｚｉｎｅ）对小鼠巨噬细胞ＲＡＷ２￣．７中肿瘤坏死因子一ａ（ＴＮＦ—ａ）表达的影响。方法应用Ｍ１Ｔｒ考察川Ｉ芎嗪对 脂多糖（１ｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）诱导的ＲＡＷ２￣．７细胞活力的影响；利用ｒｅａｈｉｍｅ ＰＣＲ观察川芎嗪对ＬＰＳ诱导的ＲＡＷ２６４．７细胞中ＴＮＦ—Ｑ ｍＲＮＡ 表达的影响；通过ＥＬＩＳＡ的方法考察川芎嗪对ＬＰＳ诱导的ＲＡＷ２￣．７细胞中ＴＮＦ一Ⅱ分泌的影响。结果１０ ｎｇ的ＬＰＳ和０－８～２０ ｌ－ｔ ｍｏｌ／Ｌ的川Ｉ芎嗪 对ＲＡＷ２６４．７的细胞活力没有明显影响；进一步研究发现川芎嗪在Ｏ－８～２０ Ｉｔ ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内可以剂量依赖性地抑制ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ—ａ ｍＲＮＡ 的表达，并且能够抑制ＬＰＳ诱导的ＲＡＷ２￣．７细胞ＴＮＦ—Ｑ的分泌。结论川芎嗪能够抑制小鼠巨噬细胞ＲＡＷ２６４．７中ＴＮＦ一Ⅱ的水平。 【关键词】ＪＪｆ芎嗪；巨噬细胞；肿瘤坏死因子一ｎ 肿瘤坏死因子一ａ（ＴＮＦ—ａ）作为常见的炎症因子之一， 川Ｉ芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ．Ｈｏａ）是常用的中草药，具有 主要由巨噬细胞分泌，可以在炎症疾病的早期和损伤过程中快 活血行气、祛风止痛等功效 ］。川Ｉ芎嗪（Ｌｉｇｕｓｔｒａｚｉｎｅ）为川芎中 速被诱导用于自我的修复 】。但是ＴＮＦ—ｎ过量产生则会引起 主要的有效成分，具有抗炎、抗氧化、抗血小板聚集等多种药理 多种十分严重的炎症疾病，包括类风湿性关节炎、动脉粥样硬 效应。本研究选取小鼠ＲＡＷ２６４．７巨噬细胞，考察川芎嗪对脂 化、阿尔茨海默病、肿瘤等［２－３１ｏ因此，抗炎治疗，尤其抗ＴＮＦ—ｎ 多糖（１ｉｐｏｐｏ１ｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）诱导下细胞活力的影响和炎症应 治疗，是针对多种炎症疾病的有效策略。 答，以期为川芎嗪临床治疗炎症疾病的思路提供实验参考。 表１：方法回收率测定结果（ｎ＝９） 实验中样品处理后，直接取上层正己烷进样２ ｕ Ｌ。因为在正己 烷的不同位置取样注入色谱仪２ ｕ Ｌ，色谱分析结果无差异，表明 该溶液是一个均匀溶液，可以直接进样分析；２ Ｌ的进样体积， 能满足色谱柱的分离要求。如要浓缩至０．２ ｍＬ则精密度难于控 制：①吸取上层正己烷时，由于样品在预处理过程中存在一定的 乳化现象，很难保证精密吸取４．０ ｍＬ正己烷；②上层正己烷浓缩 至０．２ ｍＬ，由于购买不到合适的浓缩管，很难保证浓缩至０．２ ｍＬ 的精密度。故直接取上层正己烷进样２ ｕ Ｌ。为样品处理后的上 层正己烷，由于离心过程是一个溶质均匀分散的溶液＿７］。 样品在预处理过程中易成乳化，离心时适当降低温度或延 长离心时间，即可破坏乳化层。若处理后，乳化仍未完全破除， ３．５精密度考察 可在振荡器上轻微振荡后，再次离心。 取“２．３”中浓度为１１．８４ ｕ ｇ／ｍＬ的溶液，连续进样５次，对 正己烷为溶剂直接配制的对照品溶液，每次进样前一定要 照与内标峰面积比值为２．８８７ ３１、２．８９６ １７、２．８９５ ５２、２．９３４ ７８、 摇匀，否则易出现较大进样误差。 ２．８９７ ６７，ＲＳＤ为０．７％，表明精密度良好 １。 综上，磷酸三丁酯在１．４８～１１．４８ １．ｔ ｇ／ｍＬ浓度范围内线性 ３．６重复性试验 关系良好（，＝０．９９９ ９），检测限０．５１８ ｎｇ，定量限为１．４８ ｎｇ，回 取阴性样品溶液３ ｍＬ，置具塞玻璃离心管中，精密加入对 收率为９３．９％（月＝９，ＲＳＤ＝２．７％）。此方法可用于马破伤风 照品溶液、内标溶液各５０ Ｌ，按“２．２．４”项下操作，进样分析， 免疫球蛋白Ｆ（ａｂ’），中磷酸三丁酯的含量测定，可作为该药品 对照与内标峰面积比值为１．６７０ ５５、１．６９２ ５４、１．６５４ ６１、１．６６８ 的安全性监测方法之一。 ６１、１．６６１ １２、１．７１９ ０８，ＲＳＤ为１．３４％，表明重现性良好。 参考文献 ３ ７稳定性试验 ［１］国家药典委员会．中国药典．三部．２０１０：２１７—２３１，附录３９． 取一份样品溶液，按“２．３”项下操作后，分别以０、４、８、２０、 ［２盛凤仙．冻干人纤维蛋白胶制品中磷酸三丁酯残留量气相色谱 ２］２４、４８、７２ ｈ进样分析，磷酸三丁酯对照与磷酸三丙酯内标峰面 法的测定．中国医药工业杂志，２００２，３３（３）：１３７—１３８． 积比值分别为０．３９２ １３、０．３７２ ２９、０．３７９ ９４、０．３９９ ４９、０．３８６ ４５、 ［３］刘婷婷，徐琛，陈益乐，等．气相色谱法测定医用纤维蛋白胶制 ０．３７７ ３１、０．３８０ １４，ＲＳＤ为２．５％，表明７２ ｈ内样品溶液稳定 ］。 品中磷酸三丁酯残留量．中国临床药学杂志，２０１１，２０（４）：２２５—２２８． ３．８样品测定 ［４］薛毅，王庆才，徐俊，等．纤维蛋白胶对实验性肝损伤的止血效 取３批样品，按“２．２．４”项下的操作，照上述色谱条件，进样 果观察．中华实验外科杂志，１９９６，１３（３）：１５１－１５２． 分析，按内标法计算样品中磷酸三丁酯的含量。３批样品的平 ［５］丁天然，张永信．马破伤风免疫球蛋白Ｆ（ａｂ ）２及其『｝缶床应用 均含量分别为２．２２、２．１５、２．３９ ｕ ｇ／ｍＬ。 前景．上海医药，２０１２，３３（１９）：１３—１５． ４讨论 ［６周海云，６］江丽君．人破伤风免疫球蛋白及其应用．微生物学免疫 《中国药典》２０１０年版三部收载的磷酸三丁酯残留的检测方 学进展，２００６，３４（２）：８４—８６． 法中样品处理后，需小心吸取上层正己烷（约有４ｍＬ），用空气流 ［７］张小燕，邓国权，林漓，等．两种方法配制破伤风抗毒素皮试液 将其浓缩至０．２ ｍＬ（不能加热），取０．１ ｕ Ｌ进样分析。而我们在 的皮试结果对比．中国医药导报，２０１２，９（２６）：２９—３０． ｌ２４ ｌＩＩｔ 处打约第１３卷筇９Ｗｔ １材料与方法 Ｏ ｌ・实验研究・ １ １仪器与试剂 荧光酶标仪（ＢｉｏＴｅｋ，型号：Ｓｙｎｅｒｇｙ ２）；实时定量ＰＣＲ仪 （ＡＢＩ公司，型号：７３００）。 Ｏ 川Ｉ芎嗪（上海现代哈森药业有限公司），脂多糖（Ｓｉｇｍａ公 司），Ｍ１Ｔｒ（Ｓｉｇｍａ分装），Ｒｅａｈｉｍｅ—ＰＣＲ反应试剂盒（Ｔａｋａｒａ公 司），小鼠ＴＮＦ—Ｑ检测试剂盒（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ公司）。 疾０ 薰 ０ Ｏ 细胞系ＲＡＷ２６４．７人乳腺癌细胞从ＡＴＣＣ细胞库获得。培 养于含１０％胎牛血清以及１００ ｍｇ／ｍＬ链霉素和１００ ＩＵ／ｍＬ青霉 素的ＤＭＥＭ培养基（Ｇｉｂｃｏ），在３７℃，５％Ｃ０，培养箱中进行常 规培养。 １ ２方法 １．２．１ ＭＴＴ法测定细胞活力 ＲＡＷ２６４．７细胞按每孔２×１０ 种于９６孔板中过夜培养，经 过０．８、４、２０ ｕ ｍｏｌ／Ｌ的川芎嗪或等体积ＤＭＳＯ处理２ ｈ后，再应 用１０ ｎｇ的ＬＰＳ或等体积的ＰＢＳ刺激２４ ｈ，每孔避光加入５ ｍｇ／ ｍＬ ＭＴＴ ２０ ｕ Ｌ，避光培养２ ｈ后弃去上清，每孔加入２００ ｌ－ｔ Ｌ ＤＭＳＯ，作用３０ ｍｉｎ并轻微振荡后，使结晶物充分融解，待完全 溶解后用酶标仪测定４９０ ｎｍ处的吸光度。 １．２．２ Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ检测ＴＮＦ—Ｏｔ ｍＲＮＡ的含量 将ＲＡＷ２６４．７细胞在６孔板中培养，细胞生长达８０％左 右融合。给予０．８、４、２０ １２ｍｏｌ／Ｌ的川Ｉ芎嗪或等体积ＤＭＳＯ处 理和１０ ｎｇ／ｍＬ的ＬＰＳ或等体积的ＰＢＳ处理２４ ｈ后，使用Ｔｒｉｚｏｌ 试剂提取 ￣，ＲＮＡ，并用Ｍ—ＭＬＶ逆转录酶将２ ｕ ｇ ＲＮＡ进行 逆转录。以Ｄ—ａｃｔｉｎ为内参，ＴＮＦ—Ｑ引物（５ 一ＧＧＴＣＣＣＣＡ ＡＡＧＧＧＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣ一３ 和５ 一ＣＣＡＣＴｒＧＧＴＧＧＴＴＴＧＣＴＡＣ ＧＡＣＧ一３ ）， —ａｃｔｉｎ（５ 一ＧＴＧＡＣＧＴＴＧＡＣＡＴＣＣＧＴＡＡＡＧＡ一３ 和５ 一ＧＣＣＧＧＡＣＴＣＡＴＣＧＴＡＣＴＣＣ一３ ）进行ｒｅａｌｔｉｍｅ—ＰＣＲ反应。 Ｒｅａｌｔｉｍｅ—ＰＣＲ反应体系如下：０．２５ ｕｍｏｌ／Ｌ引物共０．８ ｌ－ｔＬ，１ Ｌ ｃＤＮＡ，５ ｕ Ｌ ２×ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ，０．２ ｕ Ｌ的 ＲＯＸＲｅｆｅｒｅｎｃｅＤｙｅ，３ Ｌ的ＤＥＰＣ水，共１０ ｕＬ。荧光定量ＰＣＲ 扩增条件为９５℃预变性５ Ｓ，９５℃变性５ Ｓ，６０℃退火３１ Ｓ，６０￣Ｃ延 伸１ ａｒｉｎ，共４０个循环。 １．２．３ ＥＬＩＳＡ检测ＴＮＦ— 的分泌 ＲＡＷ２６４．７细胞按每孔２×１０ 种于２４孔板中过夜培养，给 予０．８、４、２０ ｍｏｌ／Ｌ的川Ｉ芎嗪或等体积ＤＭＳＯ处理和１０ ｎｇ／ｍＬ 的ＬＰＳ或等体积的ＰＢＳ处理，每个浓度３个副孔。处理２４ ｈ后， 收集每孔中细胞上清，按试剂说明书进行ＥＬＩＳＡ检测。 １ ３统计学分析 采用ＳＰＳＳ １８．０软件包对所得进行统计学处理，结果以 （ ｉｓ）表示，均数问的比较采用ＬＳＤ—ｔ检验。Ｐ＜０．０５表示 差异具有统计学意义；Ｐ＜０．０ｌ表示具有显著性差异。 ２结果 ２．１川Ｉ芎嗪对ＲＡＷ２６４．７细胞活力的影响 Ｍ１Ｔｒ的结果显示，与对照组相比，ＬＰＳ或川芎嗪处理后，对 小鼠巨噬细胞ＲＡＷ２６４．７的活性都没有明显的影响（图１）。说 明川芎嗪在０．８—２０ ｕ ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内对ＲＡＷ２６４．７细胞没有 明显的毒性作用。 ２ ２川芎嗪对ＲＡＷ２６４．７细胞ＴＮＦ—ｏｃ ｍＲＮＡ的影响 Ｒｅａｈｉｍｅ ＰＣＲ结果显示，如图２所示，ＬＰＳ可以显著诱导 ＲＡＷ２６４．７细胞中ＴＮＦ—Ｑ ｍＲＮＡ的表达，给予川芎嗪后可以显 著下调ＴＮＦ—Ｑ ｍＲＮＡ的水平，４ ｍｏｌ／Ｌ处理组与对照组相比， 差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５），２０ ｕｍｏｌ／Ｌ处理组与对照组 相比具有显著性差异（Ｐ＜０．Ｏ１），表明川Ｉ芎嗪可以显著地抑制 川芎嗪（ｕｍｏ１． ＬＰＳ（１Ｏｎｇ・ｍＬ＂ ｌ 一 ＋ ＋ ＋ ＋ 图１：川芎嗪对ＲＡＷ２６４７细胞活力的影响 １ 鼍 一０ ０ 川芎嗪（ｕｍｏＩ－ ＬＰＳ（ＩＯｎｇ・ｍＬ一 ＇ 一 －Ｉ－ －Ｉ－ ＋ －Ｉ－ 图２：川芎嗪对ＲＡＷ２６４．７细胞ＴＮＦ—ｄ ｍＲＮＡ的影响（与对照组比较， Ｐ ＜０．０５。 ＜０．０１） 川芎嗪（ｕ ｍｏＩ・ ）对照０ ０．８ ４ ２０ ＬＰＳ（１Ｏｎｇ・ｍＬ 一４－４－４－ ＋ 图３：川芎嗪对ＲＡＷ２６４ｌ７细胞ＴＮＦ－ａ分泌的影响（与对照组比较。 Ｐ ＜０．０５。 ＜０．０１） ＲＡＷ２６４．７细胞中ＴＮＦ一１２１ ｍＲＮＡ的表达。 ２．３ ＪＩｉ＝ｇ嗪对ＲＡＷ２６４ ７细胞ＴＮＦ—ｏｃ分泌的影响 与Ｒｅａｌｉｆｍｅ ＰＣＲ结果类似，川Ｉ芎嗪还可以明显降低ＲＡＷ２６４．７ 细胞ＴＮＦ－ｎ的分泌，如图３所示，从４ ｕｍｏｌ／Ｌ开始处理组与对照 组相比具有显著性差异 ＜０．０１）。 ３讨论 多种促炎性因子，例如ＴＮＦ—ｏ、ＩＬ一６、ＩＬ一１ 等在炎 症应答过程中扮演重要角色。ＴＮＦ—ａ作为一个重要的促 炎性因子，主要是由活化的单核巨噬细胞产生［５－６１。脂多糖 （１ｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）是革兰阴性菌（Ｇ一）细胞壁外膜上的 主要细胞壁外膜上的主要结构组分，可以通过结合Ｔｏｌｌ样受体 诱导ＴＮＦ一１３．的产生”】。本研究发现，川Ｉ芎嗪可以下调ＬＰＳ诱 导的小鼠ＲＡＷ２６４．７巨噬细胞ＴＮＦ—Ｑ ｍＲＮＡ的表达。进一步 ｌｌ ｌ ！ｌ｛ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｄｒｕｇ Ｖｏ１．１３ ＮＯ．９ ・实验研究・ ２５ 柚皮苷在Ｈ ＰＭＣ凝胶骨架片中缓释行为的研究 张卫敏 （菏泽医学专科学校，山东菏泽２７４０００） 【摘要】目的研究柚皮苷在ＨＰＭＣ凝胶骨架片中的释放过程及影响因素。方法通过自制渗透模型考察了柚皮苷在不同黏度、不同浓度的 ＨＰＭＣ中的渗透速率规律，又通过制备柚皮苷ＨＰＭＣ骨架片并考察其体外释放速率，验证了这一规律。结果不同浓度的ＨＰＭＣ对柚皮苷缓释片体 外释药速率和渗透速率规律一致，随着浓度和黏度的增加，ＨＰＭＣ对柚皮苷的释药速率减慢。结论柚皮苷在ＨＰＭＣ骨架片中的释药速率主要受到 药物渗透速率的影响，随着ＨＰＭＣ的浓度和黏度的增加减慢，ＨＰＭＣＫ１００Ｍ的缓释效果较好。 【关键词】柚皮苷；ＨＰＭＣ；渗透速率；释药速率 柚皮苷来源于芸香科植物二氢黄酮类亲水性化合物Ⅲ，主要 存在于橙、橘、葡萄柚的果肉中，是中药骨碎补、枳实、枳壳的主 要成分 ］。柚皮苷具有抗炎、镇痛、降血压、降胆固醇等作用 ］， 常用于心脑血管类疾病的治疗 】；这类患者须长期服药，但柚皮 苷半衰期短，血药浓度波动大，为获得良好药效，可以把柚皮苷 制成缓控释制剂 ］。 羟丙基甲基纤维素（ＨＰＭＣ）是最常用的凝胶骨架材料之 但因对ＨＰＭＣ的缓释规律研究较少，一定程度上了 ＨＰＭＣ的应用ｆ６］。通常认为ＨＰＭＣ骨架片的释药机理为药物的 一 ＯＨ Ｈ Ｈ 三 】，＂ＯＨ 图１：柚皮苷的结构式 渗透和ＨＰＭＣ骨架片的溶蚀，药物的性质会影响ＨＰＭＣ的释药， 亲水性药物主要受药物渗透速率的影响，而难溶性药物主要受骨 ｍＬ容量瓶中，加水定容，于２８２ ｎｍ测定吸光度，以吸光 架片溶蚀的影响。柚皮苷为亲水性药物，本文以自制渗透模型考 置于５０ ４）对质量浓度（ｃ）做线性回归，得方程：Ａ＝３２．１Ｃ一０．８１，， 察了不同黏度和浓度的ＨＰＭＣ对柚皮苷的透过规律，又通过考察 度（』９９９ ７。表明柚皮苷在１０～２００ ｕ ｇ／Ｌ范围内线性关系良好。 不同黏度和浓度的ＨＰＭＣ凝胶骨架片的体外释放规律，发现两种 ＝Ｏ．规律有很好的相关性，基于此，提出一种新的考察ＨＰＭＣ释药规 律的思路，希望能为开展基于ＨＭＰＣ的缓释技术提供基础。 １仪器与材料 ２．１．２柚皮苷对照溶液的配制 称取柚皮苷６．０ ｍｇ于１００ ｍＬ容量瓶中，加热水溶解，冷却 至室温，加水定容，得柚皮苷溶液。量取１０．０ ｍＬ，加水稀释３ ２．１．３ ＨＰＭＣ溶液的配制 渗透装置（自制）；半透膜ＭＷＣＯ７Ｋ（上海绿鸟科技）；电 倍，摇匀，得柚皮苷对照品溶液。热恒温水浴锅（北京医疗设备厂）；ＤＰ／３０型单冲压片机（北京国 药龙立）；ＺＲＳ一８Ｇ智能溶出试验仪（天津天大天发）；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ 分别称取黏度为５０、Ｋ４Ｍ、Ｋ１５Ｍ、ＫＩＯＯＭ的ＨＰＭＣ １ ｇ边 ＢＰ２１ １Ｄ天平（德国赛多利斯）；ＳＨＩＭＡＤＺＵ ＵＶ一２５５０紫外分光 搅拌边加入到３０ ｍＬ的８５℃热水中，待分散完全后，加冷水至 １００ ｍＬ，混匀，即得浓度为２０、１０、５ ｍｇ／ｍＬ的ＨＰＭＣ溶液。 光度计（日本岛津）。 ２．１．４渗透模型的安装检漏及装液 柚皮苷（湖北百科药业）；ＨＰＭＣ５０、Ｋ４Ｍ、Ｋ１５Ｍ、Ｋ１００Ｍ （上海卡乐康）；滑石粉（营口奥达制药）；乳糖（北京凤礼精求商 贸）；乙醇（天津凯信化学工业）。 ２方法 自制渗透模型为三室有机玻璃模型，四角用螺丝钉固定，各 室之间以ＭＷＣＯ７Ｋ７Ｋ半透膜隔开。用蒸馏水检漏。三室分别 ２．１渗透速率的测定 ２．１．１标准曲线的绘制 为空白室、ＨＰＭＣ溶液室、柚皮苷溶液室，体积均为１０ ｍＬ，分别 向各室注入１０ ｍＬ的蒸馏水、ＨＰＭＣ溶液、柚皮苷溶液，作为药 物渗透模型。以蒸馏水为空白模型。分别把渗透和空白模型置 Ｃ水浴锅中恒温。于６、１２、２４、３６、４８ ｈ于各模型空白室取 称取柚皮苷对照品１０．０ ｍｇ于５０ ｍＬ容量瓶中，加热水溶 于３７￣ ｍＬ，参照《中国药典》２０１０年版附录ＩｖＡ紫外一分光光度 解，冷却至室温，加水定容，分别取０．５、１．０、２．０、４．０、６．０、８．０ ｍＬ 液１研究还发现川芎嗪也可以显著抑制ＴＮＦ—ａ蛋白的分泌。同 时，川芎嗪对ＲＡＷ２６４．７细胞的活力则没有明显影响，提示川Ｉ 芎嗪下调的ＴＮＦ—ａ水平的作用并不是通过细胞毒性作用产生 ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ：ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｒｅｖｉｅｗ ａｎｄ ｍｅｔａ—ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒａｒｅ ｈａｒｍ￣ｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｉｎ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌｓ．ＪＡＭＡ，２００６，２９５（１９）：２２７５—２２８５． ］Ｒａｎ Ｘ，Ｍａ Ｌ，Ｐｅｎｇ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ：ａ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ＰｈａｒｍＢｉｏｌ，２０１１，４９（１１）：１１８０—１１８９． 的。本研究也为临床上应用川芎嗪治疗炎症疾病提供了实验 依据。 参考文献 ［１］Ｏｌｄ ＬＪ．Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ（ＴＮＦ）．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８５，２３０（４７２６）： ６３０－６３２． ［５］５ Ｇｏｎｇ Ｘ，Ｚｈｏｕ Ｊ，Ｚｈｕ Ｗ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｃｅｓｓｉｖｅ ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｏｎ０ｃｖｔｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｔｏ ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ ７１ ｉｎ ｃｔｉｏｎ．ＢＭＣ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ，２０１２，１２（１）：２２４． ［６］Ｙｕ Ｄ，Ｚｈｕ Ｈ，Ｌｉｕ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｙｔｏｋｉｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｍｏｕｓｅ ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ ｂｙ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｊ Ｖｉｒｏｌ， ２００９，８３（２３）：１２２０４—１２２１４． ［２】Ａｇｇａｒｗａｌ ＢＢ．Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ ｏｆ ｔｈｅ ＴＮＦ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ：ａ ｄｏｕｂｌｅ— ｅｄｇｅｄ ｓｗｏｒｄ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００３，３（９）：７４５—７５６． ［３］Ｂｏｎｇａｒｔｚ Ｔ，Ｓｕｔｔｏｎ ＡＪ，Ｓｗｅｅｔｉｎｇ ＭＪ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉ—ＴＮＦ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｉｓｋ ｏｆ ｓｅｒｉｏｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ ［７］Ａｋｉｒａ Ｓ，Ｔａｋｅｄａ Ｋ．Ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ， ２００４，４（７）：４９９－５１】．
