·５９６·生堡丛堡痘堂蓥蠢垫！！生璺旦筮！§鲞箜！塑￡丛婴』丛！坠幽！Ｑ！，鼬！墅螋Ｕ。！吐』玉尘ｋ』中国男性痛风患者ＳＬＣ２Ａ９基因单核苷酸多态性与尿酸水平的关系周丹秋顾小叶李佩蕾马玮哲张心菊邹和建关明张瑾【摘要】目的ＳＬＣ２Ａ９是新近发现的尿酸转运子，该基因单核苷酸多态性可影响血清尿酸水平。本研究检测ＳＬＣ２Ａ９基因第６内含子ｒｓ７４４２２９５多态性在中国男性痛风和原发性高尿酸血症患者中的分布情况以及与尿酸代谢指标的相关性。方法选取２６８例原发性痛风患者和２８８名健康志愿者，分别检测血压、体质量指数、血尿酸、血糖、血脂、肾功能水平，并同时提取外周血ＤＮＡ，运用高分辨率熔解曲线（ＨＲＭ）分析ｒｓ７４４２２９５基因型，并用测序法证实。统计学方法采用ｒ检验及ｔ检验。结果运用ＨＲＭ技术能准确区分ｒｓ７４４２２９５Ａ从和ＭＧ基因型，而Ｇ／Ｇ基因型则在本研究人群中未发现。Ａ／Ａ和ＭＧ基因型在人群分布频率分别是９６．２％和３．８％。与健康对照组相比。痛风组的Ａ／Ａ和ＭＧ基因犁频率及Ａ、Ｇ等位基因频率分布差异无统计学意义（ｒ＝０．００３，Ｐ＝Ｏ．８２；ｒ＝０．００３，Ｐ＝－Ｉ．００），但携带Ａ／Ｇ基因型个体的尿酸水平［（２９３＋１００）斗ｍｏｌ／Ｌ］明显低于携带ⅣＡ基因型的个体［（３９２±１３３）斗ｍｏｌ／Ｌ］（ｔ＝２．４２６，Ｐ＜０．０１），且正常尿酸组内ＭＧ基因型频率明显高于高尿酸组（ｒ＝６．２７９，Ｐ＝０．０１），基于ＨＲＭ技术的基因分型结果与测序法所得结果完全一致。结论ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５多态性可能是评估中国汉族男性人群原发性高尿酸血症危险性的一个遗传学标志，ＨＲＭ技术简单、方便、快速，并实现闭管检测，非常适合单核苷酸多态性分析。【关键词】高尿酸血症；尿酸；单核苷酸多态性；痛风；ＳＬＣ２Ａ９ＭｏｌｅｃｕｌａｒａｎａｌｙｓｉｓｏｆａＳＮＰｉｎＳＣＬ２Ａ９ａｎｄｕｒｉｃａｃｉｄｌｅｖｅｌｓｉｎＣｍｎｅｓｅｍａｌｅｇｏｕｔｐａｔｉｅｎｔｓＺＨＯＵＤａｎ－－ｑｉｕ‘。ＧＵＸｉａｏ－ｙｅ．ＬＩＰｅｉ—ｌｅｉ。ＭＡＷｅｉ－ｚｈｅ．ｚＨＡＮＧＸｉｎ－－ｊｕ，ＺＯＵＨｅ－ｊｉａｎ，ＧＵＡＮＭｉｎｇ，ｚＨＡＮＧＪｉｎ．＊ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ。ＪｉｎｓｈａｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＦｕｄａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００５４０，ＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ｚＨＡＮＧＪｉｎ．Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎ百ｉｎ＿．ｊｈｂ＠１６３．ｃｏｍ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ｏｂｊｅｃｔｉｖｅＳＬｃ２Ａ９ｉＳａｎｏｖｅｌｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｕｒａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｔｈａｔａｆｆｅｃｔｓｓｅｒｕｍｕｒｉｃａｃｉｄｌｅｖｅｌｓ．Ｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙｉｓａｉｍｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ玛７４４２２９５ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｉｎｉｎｔｒｏｎ６ｏｆＳＩｆ２Ａ９ｉｎａｐｏｐｕｌａ—ｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎｅｓｅｍａｌｅｇｏｕｔｏｒｈｙｐｅｍｒｉｃａｅｍｉａｓｕｂｊｅｃｔｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｔｏｔａｌｏｆ２６８ｇｏｕｔｐａｔｉｅｎｔｓａｎｄ２８８ｈｅａｌｔｈｙｍａｌｅｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓｗｅｒｅｉｎｃｌｕｄｅｄ．Ｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ。ｂｏｄｙｍａｓｓｉｎｄｅｘ（ＢＭＩ），ｓｅｒｌｌｍｕｒｉｃａｃｉｄ，ｇｌｕｃｏｓｅ，ｌｉｐｉｄ，ｕｒｅａａｎｄｅｒｅａｔｉｎｅｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄ．ＤＮＡＷａｓｐｕｒｉｆｉｅｄｆｒｏｍｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄａｎｄｔｈｅｒｓ７４４２２９５ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍＷｔＬｓ，ｅｖａｌｕａｔｅｄｕｓｉｎｇｈｉｇｈｒｅｓｏｉｕｔｉｏｎｍｅｌｔｉｎｇ（ＨＲＭ）ａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｄｉｒｅｃｔｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．Ｄａｔａｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｗｉｔｈｔｔｅｓｔｏｒｃｈｉ—ｓｑｕａｒｅｔｅｓｔ．ＲｅｓｕｌｔｓＡ／ＡａｎｄＭＧｇｅｎｏｔｙｐｅｓｗｅｒｅｕｎａｍｂｉｇｕｏｕｓｌｙｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｅｄｗｉｔｈＨＲＭｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．１１１ｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆｔｈｅｈｏｍｏｚｙｇｏｕｓｔｙｐｅ（Ｇ／Ｇ）ｗａｓｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙａｂｓｅｎｔａｍｏｎｇｔｈｅｓｔｕｄｙｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．ＴｈｅｐｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆｔｈｅＡ／ＡａｎｄＭＧｇｅｎｏｔｙｐｅｗａｓ９６．２％ａｎｄ３．８％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ＵＯｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｇｅｎｏｔｙｐｅｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓｗｅｒｅｆｏｕｎｄｉｎｇｏｕｔｐａｔｉｅｎｔｓａｎｄｎｏｒｍａｌｓｕｂｊｅｃｔｓ∽＝０．００３，Ｐ＝Ｏ．８２；ｒ＝Ｏ．００３．Ｐ＿１．００）．ＢｕｔｔｈｅｓｅｌａｌｍｕｒｉｃａｃｉｄｌｅｖｅｌｓｉｎｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｗｉｔｈｔｈｅＭＧｇｅｎｏｔｙｐｅ【（２９３±１００）ｐ，ｍｏｌ／ＬＪｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｄｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｗｉｔｈｔｈｅＭＡｇｅｎｏｔｙｐｅ【（３９２±１３３）ｐ，ｍｏｌ／ＬＪ（ｔ＝２．４２６，Ｐ＜０．０１）．ＴｈｅＡ，ＧｇｅｎｏｔｙｐｏｆｒｅｑｕｅｎｃｙＷａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｄｙｈｉｓｈｅｒｉｎｔｈｅｌｏｗ—ｕｒｉｃａｃｉｄｇｒｏｕｐｔｈａｎｉｎｔｌＩｅｈｉｇｈｕｒｉｃ—ａｃｉｄｇｒｏｕｐ（ｒ＝６．２７９．Ｐ－－０．０１）．ＧｅｎｏｔｙｐｉｎｇｂａｓｅｄｏｎＨＲＭｗａｓｆｕｌｌｙｃｏｎｃｏｒｄａｎｔｗｉｔｈｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｍ７４４２２９５ｉｎＳＬＣ２Ａ９ｍａｙｂｅｇｅｎｅｔｉｃｍａｒｋｅｒｔｏａ．ｓｓｅｓｓｒｉｓｋｏｆｈｙｐｅｎＪｒｉｃｅｍｉａａｍｏｎｇＣｈｉｎｅｓｅｍａｌｅＨａｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．ＨＲＭｉｓａｓｉｍｐｌｅ，ｆａｓｔ，ｒｅｌｉａｂｌｅａｎｄｃｌｅｓｅ－ｔｕｂｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｆｏｒｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｈｙｐｅｒｕｒｉｃａｅｍｉａ；Ｕｒｉｃａｃｉｄ；Ｓｉｎｇｌｅｎｕｃｌｅｏｆｉｄｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；Ｇｏｕｔ；ＳＬＣ２Ａ９ＤＯＩ：１０．３７６０１ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－７４８０．２０１１．０９．００４基金项目：浙江省台州市．＊ｑ－ｔｔ计划项目（０９０ＫＹ４１）作者单位：２００５４０上海，复旦大学附属金山医院检验科（周丹秋）；复旦大学附属华山医院中心实验室（顾小叶、马玮哲、张心菊、关明）．护理部（李佩蕾），风湿科（邹和建）；浙江省台州市立医院检验科（张瑾）通信作者：张瑾，Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｊｉｎ．．ｊｈｂ＠１６３．伽万方数据主堡拯湿痘堂盘查２Ｑ！！堡窆旦筮！』鲞箜皇魍￡丛ⅡＪＢｈ曼！！啦ｇ！Ｑ！，曼！Ｐ！！堕尘曼１２Ｑ！！。№ｌ：！』，胜Ｑ：２·５９７·已清楚遗传因素在痛风与原发性高尿酸血症的发生中起着重要作用。在痛风患者的家族成员中，无症状的高尿酸血症的发生率为２５％。７０％ｍ。最近，２个的全基因组关联分析（ｇｅｎｏｍｅ—ｗｉｄｅａｓｓｏｃｉ—ａｔｉｏｎｓｔｕｄｙ，ＧＷＡＳ）研究都显示ＳＬＣ２Ａ９的基因多态性与血清尿酸水平的升高及痛风相关１２－３１。ＳＬＣ２Ａ９（也可以称为ＧＬＵＴ９）是果糖转运子．该基因家族的成员对维持葡萄糖的稳定起重要作用。最新的研究发现它不仅可以作为葡萄糖的转运蛋白，也可以作为尿酸盐的转运蛋白，负责从尿液中重吸收尿酸盐到血液中。该蛋白质的功能损害与特发性的。肾性低尿酸血症有关，其原因是由于突变导致ＳＬＣ２Ａ９失活使其对尿酸盐的重吸收下降ｔ４１。针对不同人种中ＳＬＣ２Ａ９基因的ｒｓ７４４２２９５基因型与疾病相关性的研究已有报道，在一项全基因组关联分析中围，ｒｓ７４４２２９５位点被视为与血中尿酸水平最具有相关性的位点，然而在中国汉族人群中ｒｓ７４４２２９５单核苷酸多态性的研究尚未见报道。高分辨率熔解曲线技术（ｈｉｇｈｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｍｅｌｔ，ＨＲＭ）是近年发展起来的简单、可靠的基因分型方法。ＨＲＭ是基于核酸的物理性质，通过饱和染料监控核酸的熔解曲线变化进行分析的一种技术。它是在常规聚合酶链反应（ＰＣＲ）基础上增加一种饱和染料，无需使用序列特异性探针。ＨＲＭ检测不受突变碱基位点和种类的局限，具有高灵敏度、高特异性、简单方便、成本低、高通量等优点，可应用于基因分型、短片段重复序列的分析、序列匹配、突变扫描、甲基化和ＲＮＡ编辑等多方面。近年来它已为生命科学中的热点技术。本研究建立以ＨＲＭ检测ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５多态性的方法，并分析其基因型与中国汉族男性痛风的易感性以及与尿酸水平的关系。ｌ对象与方法１．１研究对象２６８例男性痛风患者，符合美国风湿病学会的诊断标准。年龄３４—７６岁。平均（５６±１２）岁；２８８名年龄匹配，无个人及家族痛风、高尿酸史的男性健康者作为对照组，年龄３０。７９岁，平均（５６±１６）岁。均来自复旦大学附属华山医院，该研究经华山医院伦理委员会批准。１．２试剂和仪器ＱＩＡａｍｐＤＮＡＢｌｏｏｄＭｉｎｉＫｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ，德国），ＨｏｔＳｔａｒＴａｑＭａｓｔｅｒＭｉｘ（Ｑｉａｇｅｎ），ＳＹＴＯ９（１ｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，美国），ＡＢＩ９７００基因扩增仪（ＡＢＩ，美国），Ｒｏｔｏｒ一万方数据ＧｅｎｅＱ（Ｑｉａｇｅｎ），水平电泳仪（天能，中国），Ｔａｎｏｎ２５００凝胶成像分析系统（天能。中国），引物由上海生工生物工程有限公司合成。１．３方法１．３．１’标本采集与ＤＮＡ抽提：乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）抗凝的真空采血管采集静脉血，使用ＱＩＡａｍｐＤＮＡＢｌｏｏｄＭｉｎｉＫｉｔ按照说明书提取ＤＮＡ。１．３．２空腹静脉采集血标本：血清尿酸、尿素、肌酐、总胆同醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ—Ｃ）和低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ—Ｃ）用７６００生化分析仪（ＨｉｔａｃｈｉＬｔｄ，日本）检测。并记录血压、体质量等ｌ｜缶床资料。１．３．３ＨＲＭ检测：采用Ｐｒｉｍｅｒ３软件（ｈｔｔＤ：ｌ／ｆｒｏｄｏ．ｗｉ．ｍｉｔ．ｅｄｕ／）设计ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５扩增引物，由上海生工生物工程有限公司合成。上游引物为５’一ＴＧＡＴＡＡＡＡＡＴＣＡＡＡＡＧＴＴＣ’ｒｒＣＴＣＴＴＣ一３’，下游弓Ｉ物为５’一ＴＧＡＴＡＡＡＡＡＴＣＡＡＡＡＧＴＴＣＴＴＣＴＣＴＴＣ一３’．扩增片段长度为１５ｌｂｐ。反应体系包括：ＤＮＡ模板ｌｐ，ｌ，１０ｘ聚合酶链反应（ＰＣＲ）ｂｕｆｆｅｒ（Ｍ９２＋Ｆｒｅｅ）２．５斗ｌ，ＭｇＣｌ２（２５ｍｍｏｌ／Ｌ）１．５斗ｌ，上、下游引物（５０ｍｍｏｌ／Ｌ）各Ｏ．５斗ｌ，ｄＮＴＰ（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）２．０ｗｌ，ＳＹＴＯ９（１．５斗ｍｏｌ／Ｌ）染料０．７５斗ｌ，Ｔａｑ聚合酶（５ｕ，Ｌ）０．１２５恤ｌ，最后去离子水补足２５山。ＰＣＲ扩增条件为：９５℃预变性２ｒａｉｎ；然后９５℃３０ｓ，５６℃３０ｓ，７２℃３０ｓ，共４０个循环；７２℃延伸２ｍｉｎ，１０ｏＣ停止。然后在Ｒｏｔｏｒ－ＧｅｎｅＱ进行高分辨熔解分析，条件为：９５℃２ｍｉｎ，６０℃２ｍｉｎ预处理后，熔解温度从７５℃到９５℃，每升高０．１℃采集一次数据。获得高分辨熔解曲线图，进行分析。１．３．４测序分析：随机抽取１０例标本，用上述引物在ＡＢＩ９７００扩增仪上扩增，反应体系除不加ＳＹＴＯ９染料外其余同前，终体积用去离子水补足２５仙ｌ。ＰＣＲ扩增条件同上，产物送上海华大基因科技股份有限公司测序。１．４统计学处理正态分布计量资料用；±ｓ表示，数据间比较采用ｔ检验；计数资料行ｒ检验。用Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｉｇ检验确认标本的群体代表性。以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。２结果２．１运用ＨＲＭ及测序进行基因分型：采用ＨＲＭ检测ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５多态性获得２种类型曲线的标准视图（图１），经测序后得知分别代表２种·５９８·史堡凰堡痘堂苤查垫！！生窆旦箜１５鲞筮窆塑￡丛卫』鼬！！墅丛丛，墅出磐遮！至Ｑ！！，ｙ鱼：！』，塑垒：！基因型：Ａ／Ａ基因型与Ａ／Ｇ基因型。没有发现Ｇ／Ｇ基因型。荧光强度随温度升高下降，由于Ａ／Ｇ基因型为杂合子型，稳定性较差，所以在较低的温度就开始解２．２ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５基因型和等位基因频率在痛风与原发性高尿酸血症患者中分布：见表１。ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５的等位基因和基因型在不同人群中的分布。用ｒ检验各基因型与等位基因频率分布符合Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ遗传平衡定律（尸＞０．０５），ⅣＡ、Ａ／Ｇ２种基因型在痛风患者组和健康对照组的频率分别为：９６．３％、３．７％和９６．２％、３．８％，基因型的分布在痛风患者组和健康对照组差异无统计学意义，但根据血尿酸水平把所有受试者按照原发性高尿酸血症诊断标准分为２组：正常尿酸组（血尿酸＜４２０Ｉｘｍｏｌ／Ｌ）与高尿酸组（血尿酸Ｉ＞４２０ｌｒｍｏｌ／Ｌ）。链，但解链较为缓慢，坡度较缓慢，Ｍ犁解链起始温度较高，但解链速度较快（图１ｏ为了使ＨＲＭ检测判断更直观，采用软件将图像转换为熔解温度表示（图１），～Ａ型熔解温度（Ｔｉｎ）值为８０．１０Ｃ，Ａ／Ｇ为双峰，Ｔｍ值分别为８０．３℃和７９．５℃。无论采取何种视图，都可以容易地区分Ａ／Ａ基因型与Ａ／Ｇ基因型。随机选取１０例标本进行测序发现，采用ＨＲＭ检测ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５基因型的结果与采用测序法的结果之间符合率为１００％。正常尿酸组中Ａ／Ｇ基因型的频率显著高于刖Ａ基因型的频率。２．３ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５基因型与临床参数的关系：分析不同人群的基因型与临床资料的关系，发现Ａ，Ａ基因型的尿酸水平明显高于ＭＧ基因型（ＲＯ．０１），而年龄、体质量、血压、血尿素、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、ＨＤＬ—Ｃ和ＬＤＬ—Ｃ在所有受试者内各基因型间的差异没有统计学意义，结果见表２。熔解溶度（℃）标准视图３．Ｏ３讨论越来越多的证据表明遗传因素影响血液尿酸水平。２００２年，ＳＬＣ２２Ａ１２被确认是‘肾脏的尿酸一阴离子转运子。ＳＬＣ２２Ａ１２突变引起的功能丧失会引起肾脏特发性的低尿酸血症１６１。先前的研究中检测了中国男性人群中ＳＬＣ２２Ａ１２基因ｒｓ８９３００６位点单核苷酸多态性，发现１Ｔｒ等位基因的出现与低尿酸水平相熔解溶度（℃）魁２·５唾２．０蒸”蒌－．ｏ０．５Ｏ关，从而导致３种基因型的尿酸水平差异有统计学意义问。但是，日本学者发现即使ＳＬＣ２２Ａ１２基因未发生突变患者体内也具有低尿酸水平的现象１５１，提示熔解温度视图图１高分辨熔解技术检测ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５表１痛风人群和高尿酸人群中的ｒｓ７４４２２９５基因型和等位基因分布注：－与Ａ，Ａ型组比较ｔ＝２．４２６．Ｐ＜Ｏ．０１万方数据史堡匝星痘堂盘查垫！！堡２旦蔓！』鲞筮窆塑￡丛Ⅱ』鲢ｈ！Ｈ塑！Ｑｉ。曼Ｐ！￡班ｂ§！至Ｑ！！，ｙＱｌ：！』，盥Ｑ：窆·５９９·在肾脏中存在着其他重要的尿酸转运子。最近．基因组学的相关研究揭示．在基因ＳＬＣ２Ａ９内存在与尿酸水平最具有相关性的单核苷酸多态性位点。在本研究中，我们对中国人群中原发性痛风患者及对照组的ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５的多态性进行了检测。结果发现在中国男性中，Ａ及Ｇ等位基因的频率分别为９８．１％及１．９％，未出现Ｇ／Ｇ型的纯合子突变。痛风患者与健康对照者的基因型差异无统计学意义。按照美国国立生物技术信息中心（ＮＣＢＩ）的记载，Ｇ等位基因的频率在高加索人中为２５．０％，在Ｓｕｂ—Ｓａｈａｒａｎ人中为３７．５％。因此，我们研究的人群中Ｇ等位基因的频率是已知文献报道中最低的（１．９％ｏ据报道ＳＬＣ２Ａ９基因ｒｓ７４４２２９５多态性与尿酸水平具有很强的相关性１５１，我们的研究目的是为了确定该位点的多态性是否也影响中国人的尿酸水平。我们在研究中同时检测了个体的尿酸浓度及其他生化指标。结果发现纯合子ⅣＡ基因型的携带者较杂合子ＭＧ型者具有更高的尿酸水平［（刖Ａ（３９２＋１３３）Ｉ上ｍｏｌ／Ｌ，Ａ／Ｇ（２９３±１００）ｐｍｏｌ／Ｌ］。与高尿酸组比较。低尿酸组出现Ｇ等位基因的频率更高，与先前的研究相一致Ｉｇｌ，因此，这个单核苷酸多态性标志可以作为潜在的原发性高尿酸血症的分子标志物。最近，已有研究证实ＳＬＣ２Ａ９的功能是从肾小管近曲小管上皮细胞往外转运尿酸，从而对血清尿酸具有直接的调节作用。ＳＬＣ２Ａ９基因的其他位点也可导致高尿酸血症及痛风。ＭｃＡｒｄｌｅ等１９１发现ＳＬＣ２Ａ９基因的另一个多态性位点（ｒｓｌ６８９０９７９）在Ａｍｉｓｈ人群中与血清尿酸浓度相关。另一项由Ｓｔａｒｋ等１８｜在德国人群中进行的研究发现，ＳＬＣ２Ａ９基因内及附近的４个多态性位点在６６５名痛风患者及６６５名健康对照者中具有显著相关性，这些研究均提示ＳＬＣ２Ａ９的多态性与痛风的发生有关。还需要进一步的研究来明确这些已确认的多态性位点是如何影响尿酸水平的。本次研究运用ＨＲＭ技术对ｒｓ７４４２２９５进行基因分型。ＨＲＭ技术在区分纯合子及杂合子基因时具有１００％的准确性。ＨＲＭ是近年来发展出的最新的ＳＮＰ及突变研究丁具．因其高通量、低成本、不受检测位点的局限，且真正实现ＳＮＰ的闭管检测而广受国内外同行的推崇。ＨＲＭ根据序列长度、ＧＣ含量和互补性分析样品。其原理是在ＰＣＲ过程中加入了新型万方数据的饱和染料（ＳＹＴＯ９等）。这类染料有着更强的ＤＮＡ结合能力和很低的抑制作用，在ＤＮＡ解链过程中不会发生重排，使用这些染料的熔解曲线有了更高的分辨率。微小的碱基的差异，可以体现在熔解温度的差别上，因此ＨＲＭ检测不受突变碱基位点和种类的局限，是一种准确、快速而又经济的方法Ｉｌｑ。总之，本研究结果揭示了中国汉族男性人群中ｒｓ７４４２２９５单核苷酸多态性Ｇ／Ｇ基因型的缺失。并首次在汉族人群中发现ｒｓ７４４２２９５单核苷酸多态性与尿酸水平的相关性，可以作为评估中国男性人群原发性高尿酸血症风险的一个遗传标志。本研究中建立的ＨＲＭ技术可以作为该单核苷酸多态性筛查的一个很有用的工具。参考文献【ｌ】ＷｉｌｋＪＢ，ＤｊｏｕｓｓｅＬ．ＢｏｒｅｅｋｉＩ，ｅｌ：ａ１．Ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆ８ｅｎｎｍｕｒｉｃａｃｉｄｉｎｔｈｅＮＨＬＢＩｆａｍｉｌｙｈｅａｒｔｓｔｕｄｙ．ＨｕｍＧｅｎｅｔ。２０００。１０６：３５５—３５９．［２１ＹａｎｇＯ，Ｃ，ｕｏＣＹ，ＣｕｐｐｌｅｓＬＡ，ｅｔａ１．Ｇｅｎｏｍｅ－ｗｉｄｅｓｅａｒｃｈｆｏｒｇｅｎｅｓａｆｆｅｃｔｉｎｇ∞ｍｍｕｒｉｃａｃｉｄｌｅｖｅｌｓ：ｔｈｅＦｒａｍｉｎｇｈⅢｈｅａｒｔｓｔｕｄｙ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ。２００５．５４：１４３５一１４４１．【３】ＬｉＳ．ＳａｎｎａＳ。ＭａｓｃｈｉｏＡ，ｅｔａ１．ＴｈｅＧＬＵＴ９ｇｅｎｅｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄＷｉｔｈＥＥｒｕｍｕｒｉｃａｃｉｄｌｅｖｅｌｓｉｎＳａｒｄｉｎｉａａｎｄＣｈｉａｎｔｉｃｏｈｏｒｔｓ．ＰＬｏＳＧｅｎｅｔ，２００７，３：ｅ１９４．［４１ＭａｔｓｕｏＨ．ＣｈｉｂａＴ．ＮａｇａｍｏｒｉＳ．ｅｔａ１．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓｉｎｇｌｕｃｏ∞ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ９ｇｅｎｅＳＬＣ２Ａ９ｅａｕｌ＊ｒｅｎａｌｈｙｐｏｕｒｉｅｅｍｉａ．ＡｍＪＨｕｍＧｅｎｅｔ。２００８，８３：７４４—７５１．【５】Ｄ６ｒｉｎｇＡ，ＧｉｅｇｅｒＣ，ＭｅｈｔａＤｊｅｔａ１．ＳＬＣ２Ａ９ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓｕｒｉｃａｃｉｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｗｉｔｈｐｒｏｎｏｕｎｃｅｄｓｅｘ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｅｆｆｅｃｔｓ．ＮａｔＧｅｎｅｔ，２００８，４０：４３ｍ－４３６．【６】ｈｕｎＣＷ。Ｋｏ嘴ＡＰ，ＴｓｕｉＴＫ．ｅｔａ１．ＡｎｏｖｅｌｍｕｔａｔｉｏｎｏｆＳＬＣ２２Ａ１２ｇｅｎｅｃａｕｓｉｎｇｐｒｉｍａｒｙｒｅｎａｌｈｙｐｏｕｒｉｃｅｍｉａｉｎａｐａｔｉｅｎｔｗｉｔｈｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ．ＣｌｉｎＣｈｉｍＡｃｔｓ·２００８·３９８：１５７－１５８．【７】ＧｕａｎＭ，ＺｈａｎｇＪ．ＣｈｅｎＹ．ｅｔａ１．Ｈｉｇｈ－ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｍｅｌｔｉｎｇａｎａｌｙ－ｓｉｓｆｏｒｔｈｅｒａｐｉｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆ¨ｉｎｔｒｏｎｉｅｓｉｎｇｌｅｎｕｅｌｅｏｔｉｄｅｐｏｌｙ－ｍｏｒｐｈｉｓｍｉｎＳＬＣ２２Ａ１２ｉｎｎｕｄｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｐｒｉｍａｒｙｇｏｕｔｉｎＣｈｉｎａ．ＳｅａｎｄＪＢｈｅｕｍａｔｏｌ，２００９。３８：２７６－－２８１．【８】ＳｔａｒｋＫ，ＲｅｉｎｈａｒｄＷ．ＮｅｕｒｅｕｔｈｅｒＫ，ｅｔａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆｃｏｍ－ｍｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｉｎＧＬＵＴ９ｇｅｎｅｗｉｔｈｇｏｕｔｂｕｔｎｏｔｗｉｔｈＣＯＬＤ－－ｎａｒｙａｒｔｅｒｙｄｉｓｅａｓｅｉｎｌａｒｇｅｃａ舱－ｃｏｎｔｒｏｌｓｔｕｄｙ．ＰＬｏＳＯｎｅ·２００８．３：ｅ１９４８．【９】ＭｅＡｒｄｈＰＦ．ＰａｎｓＡ．ＣｈａｎｇＹＰ．ｅｔａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆｅｏｍ—ｍｏｎｎｏｎｓｙｎｏｎｙｍｏｕｓｖａｒｉａｎｔｉｎＧＬＵＴ９ｗｉｔｈｓｅｒｕｍｕｒｉｃａｃｉｄｌｅｖ－ｅｌＢｉｎｏｌｄｏｒｄｅｒａｍｉｓｈ．ＡｒｔｈｒｉｔｉｓＲｈｅｕｍ，２００８．５８：２８７４—２８８１．【ｌＯ】刘双春，关明，陈字明．等．运用高分辨率熔解曲线技术检测痛风患者ＳＬＣ２２Ａ１２基因ｉｎｔｒｏｎ５（＋４６６８Ｃｆｌｒ）多态性．中华风湿｝菏学杂志．２０ｌＯ，１４：３７７—３８０．（收稿日期：２０１０－１ｌ一１６）（本文编辑：张跃）中国男性痛风患者SLC2A9基因单核苷酸多态性与尿酸水平的关系
作者：作者单位：
周丹秋， 顾小叶， 李佩蕾， 马玮哲， 张心菊， 邹和建， 关明， 张瑾， ZHOU Dan -qiu， GU Xiao-ye，LI Pei-lei， MA Wei-zhe， ZHANG Xin-ju， ZOU He-jian， GUAN Ming， ZHANG Jin
周丹秋,ZHOU Dan -qiu(复旦大学附属金山医院检验科, 上海,200540)， 顾小叶,马玮哲,张心菊,关明,GUXiao-ye,MA Wei-zhe,ZHANG Xin-ju,GUAN Ming(复旦大学附属华山医院中心实验室)， 李佩蕾,LI Pei-lei(复旦大学附属金山医院护理部, 上海,200540)， 邹和建,ZOU He-jian(复旦大学附属金山医院风湿科, 上海,200540)， 张瑾,ZHANG Jin(浙江省台州市立医院检验科)中华风湿病学杂志
Chinese Journal of Rheumatology2011,15(9)
刊名：英文刊名：年，卷(期)：
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