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尿素测定方法

来源:尔游网
实 验 十 七

实验名称:尿素的测定

实验目的与要求:掌握测定血清尿素的基本原理 实验仪器、试剂:半自动生化分析仪、尿素测定试剂盒 实验原理:

尿素经脲酶水解生成NH3与CO2,在谷氨酸脱氢酶(GLDH)的作用下,氨与α-酮戊二酸及还原型辅酶Ⅰ(NADH)反应生成谷氨酸和NAD+,NADH在340nm处的吸光度下降速率与待测样品中尿素的含量成正比。

操作方法:

1、将试剂R1:R2=4:1混合,即为工作液 2、按下列顺序加入各试剂

单位ml 空白 标准 样本 蒸馏水 0.01 — — 样本 - - 0.01 标准液 - 0.01 - 工作液 1.0 1.0 1.0

3、混匀各管,340nm,空白管调零,延时30秒,读取初始吸光度A1,60秒后读取A2,计算ΔA

实验现象与数据:记录ΔA

结果分析与结论:尿素=ΔA样/ΔA标×C标 (8.32 mmol/l)

参考范围:1.7-8.3mmol/l

临床意义:

实 验 十 八

实验名称:血清尿酸的测定

实验目的与要求:掌握尿酸酶-过氧化物酶耦联法测定尿酸的基本原理 实验仪器、试剂:尿酸测定试剂盒,722E/723分光光度计

实验原理:尿酸酶氧化尿酸,生成尿囊素和过氧化氢,在过氧化物酶催化下,

过氧化氢使ESBmT和4-氨基安替比林缩合成有色化合物,其在546nm吸光度与尿酸浓度成正比。

操作方法:

按以下步骤操作

单位ml 标准 测定 空白 样本 - 0.025 - 标准液 0.025 - - 蒸馏水 - - 0.025 酶试剂 1.0 1.0 1.0

混匀 37℃温浴5min,以空白管调零。546nm,0.5cm比色杯,测定各管的A

实验现象与数据:记录各管的A 结果分析与结论:血清尿酸浓度=A临床意义: 思考题:P223 第2题

样/A标×C

(357μmol/l)

参考值:男202-416μmol/L,女 142-339μmol/L

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