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作业指导书
第 1 版 第 0 次修改 编制人：批准人： 批准发布日期：
作业指导书
标题：水质总氮操作注意事项
水质总氮的测定基本操作流程按照 HJ 636-2012 水质 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解紫外分光光度 法进行，本作业指导书仅对可能影响总氮测定的注意事项进行推荐指导。 1.玻璃器皿的洗涤
所使用的玻璃器皿应先用（ 1+9）盐酸浸泡 12h 以上，再用超纯水冲洗 3~6 次才能使用，否则也会造 成空白值偏高或平行性较差的情况。（具体情况视各个实验室环境状况而定）。 2. 实验用水及试剂的质量检验
若实验的空白值不够理想，则需要对实验用水及试剂进行检验，以选择出含氮量最低的水和试剂， 获得理想的空白值。 (本实验室所使用水为超纯水，如没有超纯水机或担心滤柱效果建议用娃哈哈纯 净水进行试验验证 )；过硫酸钾为最主要影响因素，当过硫酸钾氮含量超标时会严重影响空白值，空 白吸光度超过 0.3 要优先考虑过硫酸钾影响， 可选择进口高纯度过硫酸钾或自行重结晶提纯药剂， 体方法详见《过硫酸钾提纯作业指导书》。 3. 实验室环境要求
实验室应保证清洁及通风顺畅， 做总氮试验时应与水质 氨氮的测定、 大气 氨的测定等实验分开。 如实验室有条件可将整个实验在通风橱中进行。紫外分光光度计房间应远离卫生间（厕所大气中氨 含量很高），测量时应保持通风。 4.试剂的配制
碱性过硫酸钾的配制过程十分重要，掌握不好，会影响消解效果，对测定结果产生一定的影响。过 硫酸钾的溶解速度非常慢，若要加快溶解，绝对不能随便加热，最好采用水浴加热法，且水浴温度 一定要低于 50℃，否则过硫酸钾会分解失效。配制该溶液时，可分别称取过硫酸钾和氢氧化钠，两 者分开配制，再混合定容，或者先配制氢氧化钠溶液，待其温度降到室温后再加入过硫酸钾溶解。 若两种药剂在一只烧杯中同时溶于水， 氢氧化钠溶遇水放热使溶液温度过高引起局部过硫酸钾失效。 5.消解温度、压力的控制
使用蒸气灭菌锅的实验室，消解时国标中要求达到规定温度压力后即开始计时，且温度为
120℃-124℃，时间为 30min。而本实验室经过一系列试验验证， 消解温度控制在 121℃，时间为 50min， （较国标有所延长）这样测定结果最为理想。（各实验室灭菌锅性能有差异，具体参数自行验证， 温度过高具塞比色管管口可能会炸裂）灭菌锅水应用超纯水常更换，本实验室每做一次总氮之前清 洗一次灭菌锅并更换超纯水。 6. 比色使用时注意事项
该项目的测定涉及两个波长（ 220nm和 275nm），建议在测定完一组样品的同一波长后，再调整到 另一波长，统一测定。不要测完一个样品的两个吸光度后再换另一个样品，反复调整波长可能会引 起一定的测量误差。比色皿测空白及标样样品时应用超纯水清洗干净，再用样液润洗几次再测量。 7. 试验过程
当试验标样及样品加完 5ml 碱性过硫酸钾时，应摇匀后在进行消解（加碱性过硫酸钾时不能加在 管口处，摇匀时不能将比色管倒置，这样都可能造成比色管打不开）。消解冷却至室温，加 样检测等多种方式进行质控。
1ml 盐
酸（1+9）定容至 25ml 后，应摇匀后静置 30min 再测量。 每次总氮测定以加标回收、平行双样、盲
具
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第 1 版 第 0 次修改 编制人：批准人： 批准发布日期：
标题：过硫酸钾的提纯 作业指导书
由于过硫酸钾是水质 总氮测定的最大的影响因素，特制定此过硫酸钾提纯作业指导书。
国产过硫酸钾在生产过程中，同一品牌不同批次含氮量差距较大，会对实验结果产生重大影响， 国产药剂如国药品牌过硫酸钾含氮量偏高，空白值过大，建议购买国药分析纯过硫酸钾后，采用重
结晶法自行进行提纯；也以直接购买进口试剂，如 sigma 的高纯度过硫酸钾（本公司未进行验证）。 氢氧化钠的影响因素较小使用国药分析纯氢氧化钠即可。 1.溶解
于 1000mL 广口玻璃瓶内加 800mL 超纯水，50℃水浴锅加热，然后逐渐加入碱性过硫酸钾，直至不 能溶解为止。投加比例约为 800mL 水投加 160g 过硫酸钾。加入过硫酸钾需逐勺加入，溶完再加， 此溶解过程较长。（建议上午加热溶解，因为过硫酸钾高温会分解，超过 50℃即有部分药剂分解， 本实验室溶解温度一般控制在 48.5-49.5℃） 2.结晶
把上述完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却，再放进冰箱中结晶（选用广口瓶应有盖，重 结晶过程避免引入其他污染）。同时用另一个广口瓶冰一瓶超纯水用于清洗。 3.润洗
重结晶一夜后，倒掉上清液然后用冰好的超纯水清洗几遍，结晶效果更好（重结晶的晶体会结成一 块沉在瓶底，但结构很松散，用钢勺掏一掏就散开了，然后再用超纯水清洗）。 4.烘干
洗净后倒掉上清液，然后放入 50℃烘箱烘干即可（用广口瓶烘干比较慢，可以转移到烧杯并盖上表 面皿）。整个烘干过程时间较长，应防止二次污染，也可用滤纸过滤，但也要考虑可能存在二次污 染问题。 5.总结
经过本实验室一系列试验验证，经一次结晶后的过硫酸钾试剂，所做实验矫正空白值约为
0.028-0.044。实验室如一次结晶后空白值仍然过大， 请按上述方法自行进行二次结晶。 结晶后的过硫 酸钾需密闭保存，防止污染，但随着时间推移空白值可能仍会上升，优先使用新制备的过硫酸钾。
