2017年1月 中成药 Chinese Traditional Patent Medicine January 2017 VolJ 39 No.1 第39卷第1期 tilfora[J].Phytochem Lett,2015,12:98—104. [20] Yamane T,Nakatani H,Kikuoka N,et a1.Inhibitory effects [18] +Matsui N,Chen F,Yasuda S,et a1.Conversion of guaiacyl to syringyl moieties on the einnamyl alcohol pathway during the bi and toxicity of green tea polyphenols for gastrointestinal carcino・ genesis[J].Cancer,1996,77(5):1662-1667. [21] Chen L,Lee M J,Li H,et a1.Absorption,distribution and osynthesis of lignin in angiosperms[J].Planta,2000,210 (5):831-835. elimination of tea polyphenols in rats[J].Drug Metab Disms, 1997,25(11):1045.1050. [191 Device P T,Stanely Mainzen Prince P.Protective effect of (一)-epigallocatechin-gallate(EGCG)on lipid peroxide me— tabolism in isoproterenol induced myocardial infarction in male [22] Dauer A,Metzner P,Schimmer O.Proanthoeyanidins from the bark of Hamamelis virginiana exhibit antlmutagenie properties a— Wister rats:A histopathological study[J].Biomed Pharmacoth— er,2008,62(10):701-708. gainst nitroaromatie compounds[J].Planta Med,1998,64 (4):324.327. 火龙果皮化学成分的研究 赵 兰 , 苏小建 , 王鹏程 , 杜园园 , 刘 倩 , 梁成钦 , 周先丽 (1.桂林医学院广西高校生药学重点实验室,广西桂林541004;2.广西师范大学环境与资源学院,广西 桂林541004) 摘要:目的果研究火龙果Hylocereus undatus ev.Vietnam皮的化学成分。方法应用硅胶、ODS、半制备HPLC柱,对 火龙果皮95%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇部位进行分离纯化,通过波谱数据对所得化合物的结构进行鉴定。结 从中分离出13个化合物,分别鉴定为香蒲新苷(1)、山柰酚一3一O—B—D一葡萄吡喃糖基一(1-*2)_[ -L.鼠李吡喃 糖基一(1— )一/3-D一葡萄吡喃糖苷](2)、槲皮素-3一O一新橙皮糖苷(3)、异鼠李素-3一O一芸香糖苷(4)、3 一甲氧基槲 皮素一3一O一 .L一鼠李吡喃糖基一(1— )一p—D一葡萄吡喃糖苷(5)、苄醇一B—D一葡萄糖苷(6)、大黄素_6一甲醚(7)、白藜 芦醇(8)、腺嘌呤核苷(9)、尿嘧啶核苷(10)、2-甲氧基一3一(3 -吲哚基)-丙酸(11)、0【一菠菜甾醇(12)、B-谷甾 醇(13)。结论化合物1—12均为首次从该植物中分离得到。 文献标志码:A 文章编号:1001.1528(2017)01-0111-05 关键词:火龙果;皮;化学成分;分离鉴定 中图分类号:R284.1 doi:10.3969/j.issn.1001—1528.2017.01.022 Chemical constituents from Hylocereus undatus peels ZHAO Lan , SU Xiao-jian , WANG Peng—cheng ,LIANG Cheng.qin , ZHOU Xian.1i DU Yuan.yuan ,LIU Qian , (J.KeyLaboratory ofPharmacognosyin Guangxi Universities,GuilinMedicalUniversity,Guilin541004,China;2.CollegeofEnvironmental&Resources Science,Guangxi Normal University,Guilin 541004,China) ABSTRACT:AIM To study the chemical constituents from Hylocereus undatus cv.Vietnam peels.METH. oDS The ethyl acetate and n.butyl alcoho1 fractions of 95%ethanol extract of H undatus peels were isolated and purified by silica,ODS and semi.preparative HPLC column,then the structures of obtained compounds were identi. fied by spectral data.RESULTS Thirteen compounds were isolated and identiifed as typhaneoside(1). kaempferol一3一O一13一D—glucopyranosyl-(1_2)一[o/一L-rhamnopyranosyl一(1 6)一3-D—glucopyranoside](2), quercetin一3-0-ne0hesperidoside(3),isorhamnetin一3—0一 一L—rhamnopyranosyl(1— )一p—D—glycopyranoside(4), 收稿日期:2016-04-02 基金项目:药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室课题资助(CMEMR2013一A);广西高校科学技术研究项目(YB2014272); 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科能1598025.18) 作者简介:赵兰(1992一),女,从事天然有机化学研究。Tel:(0773)2295133,E-mail:847224484@qq.eom 通信作者:周先丽(1979一),女,副教授,从事药理学和天然有机化学研究。Tel:(0773)2295133,E.mail:xlzhou2009@163.COB 111 2017年1月 中成药 Chinese Traditional Patent Medicine January 2017 V01.39 No.1 第39卷第1期 3'-0。methylquercetin一3-O。仅一L—rhamnopyranosyl-(1--- ̄6)-p-D—glucopyranoside(5),benzyl alcohol-B—D—gluco— pyranoside(6),physcion(7),resveratrol(8),adenosine(9),uridine(10),2-methyl一3一(3 一indoly1)一propi. onie acid(11), 一spinasterol(12),B—sitosterol(13).CONCLUSION Compounds 1—12 are isolated from this plant for the first time. KEY WORDS:Hylocereus undatus cv.Vietnam;peels;chemical constituents;isolation and identiication f火龙果Hylocereus undatus ev.Vietnam又称红 龙果、青龙果(越南)、仙蜜果()、仙人掌 果、芝麻果等,属于典型的热带植物,原产于中美 洲热带沙漠地区,我国于20世纪80年代在地 区开始引进试种 J,目前在广东、广西、海南、 福建、云南、贵州等省份有一定规模种植 2 J。火 龙果含有丰富的药用成分,其花主要含多糖、黄酮 和黄酮醇、三萜等化合物,有清火、消炎、明目、 润肺、止咳、降血压、抗癌、增强免疫力、治疗高 尿酸症等功效 ;其果皮有丰富的原花色素,并 包含多种活性作用,如抗氧化、降血脂、抗肿瘤 等 ,具有潜在的药用价值。为对火龙果进行综 合开发利用,本实验对其果皮的化学成分进行了研 究,共得到了13个化合物,分别为香蒲新苷 (1)、山柰酚.3一O一8.D.葡萄吡喃糖基.(1—2)一 [仪一L一鼠李吡喃糖基一(1--- ̄6)一B-D一葡萄吡喃糖苷] (2)、槲皮素一3一O一新橙皮糖苷(3)、异鼠李素一3. O一芸香糖苷(4)、3t.甲氧基槲皮素一3一O. —L一鼠李 吡喃糖基一(1— )一B—D一葡萄吡喃糖苷(5)、苄醇. B—D.葡萄糖苷(6)、大黄素 .甲醚(7)、白藜芦 醇(8)、腺嘌呤核苷(9)、尿嘧啶核苷(10)、2. 甲氧基_3.(3 一吲哚基)一丙酸(11)、仪-菠菜甾醇 (12)、B.谷甾醇(13)。 1仪器与材料 LC MS8030液质联用仪(Et本岛津公司);红 外光谱仪(美国热电公司);ML4002精密天平 (瑞士梅特勒一托利多公司);DPX一500核磁共振仪 (瑞士Bruker公司);反相硅胶ODS填料(日本 YMC公司)。硅胶(青岛海洋化工有限公司);所 用试剂均为分析纯。火龙果于2012年5月购自市 场,经广西师范大学李伯林副教授鉴定为正品。 2提取与分离 取火龙果皮29.6 kg,粉碎后95%乙醇超声提 取3次,每次约l h,过滤提取液,减压回收乙醇, 得到68.52 g浸膏。加水悬浮后,以石油醚、乙酸 乙酯、正丁醇依次萃取,得到3.74 g石油醚浸膏、 32.26 g乙酸乙酯浸膏和33.13 g正丁醇浸膏。 乙酸乙酯部位进行硅胶柱层析(150 g,100~ 1 12 200目),氯仿一甲醇梯度洗脱,得到5个组分,e. Fr.I (3.4 g)、e—Fr.11(1.9 g)、e.Fr.Ⅲ(2.4 g)、e—Fr.Ⅳ(5.8 g)、e—Fr.V(1.8 g)。e-Fr.Ⅲ 组分进行硅胶(20 g,300~400目)柱层析,氯仿一 甲醇(100:0— :100)梯度洗脱,TLC检测合并 得到3个组分,e-Fr.Ⅲ一1(0.13 g)、e.Fr.Ⅲ 2 (0.18 g)、e—Fr.m一3(0.22 g),e—Fr.ili一1和e—Fr. Ⅲ.2组分进行硅胶(300~400目)柱层析和重结 晶,分别得到化合物12(10 mg)和13(15 mg)。 e—Fr.Ⅳ组分进行硅胶(20 g,300~400目)柱层析, 氯仿-甲醇(100:0 :100)梯度洗脱,得到3个 组分,e-Fr_Ⅳ-1(0.3 g)、e—Fr.Ⅳ-2(1.4 g)、e— Fr.Ⅳ-3(2.4 g),e.Fr.Ⅳ一2组分进行硅胶柱层析, 甲醇重结晶,得到化合物8(17 mg);e—Fr.Ⅳ一3 组分进行硅胶(10 g,300~400目)柱层析,氯仿- 甲醇梯度洗脱,得到化合物7(11 mg)。 正丁醇部位进行硅胶(200 g,100—200目) 柱层析,氯仿一甲醇(0:100---H00:0)梯度洗脱, TLC检测合并得到5个组分,Fr.I(7.1 g)、Fr. Ⅱ(1.2 g)、Fr.HI(2.2 g)、Fr.1V(1.6 g)、Fr. V(1.2 g)、Fr.VI(0.7 g)。Fr.I、Fr.Ⅲ、Fr. Ⅳ经MCI柱(MeOH:H O:9:1)脱色,得到 90%甲醇部分,再通过半制备HPLC色谱仪,以 Agilent ZORBAX SB—Cl8色谱柱(250 mm×9.4 mm, 5 Ixm)进行分离纯化,结果从Fr_I组分(10%一 35%甲醇)中得到化合物6(38.0 mg),Fr.II组 分(15%一50%甲醇)中得到化合物1l (10.6 mg),Fr.IU组分(15%一25%甲醇)中得 到化合物2(2.6 mg)和3(2.8 mg),Fr.Ⅳ组分 (不同体积分数甲醇)中得到化合物1(7.8 mg)、4 (7.7 mg)、5(13.9 mg),Fr.Ⅵ组分(10%甲醇) 中得到化合物9(12.3 mg)和10(15.1 mg)。 3结构鉴定 化合物1:黄色无定形粉末,ESI—MS m/z: 769 I M.H I一。 H.NMR(500 MHz,DMSO—d6) : 7.83(1H,d,J=2.0 Hz,H一2 ),7.47(1H, dd,J=8.4,2.0 Hz,H-6 ),6.90(1H,d,J= 8.4 Hz,H-5 ),6.40(1H,s,H一8),6.17(1H, 2017年1月 中成药 Chinese Traditional Patent Medicine January 2017 Vo1.39 No.1 第39卷第1期 s,H-6),5.61(1H,d,J=7.4 Hz, H一1” 4.99(1H,s,H一1””),4.37(1H,s, H.1 , 8.2 Hz,H一5 ),6.37(1H,d,J=1.8 Hz,H一 , 8) 6.18(1H,d,J=1.9 Hz,H-6),5.78 (1H,d,.,=7.7 Hz,H一1”),5.22(1H,s,H一 1)。13 C—NMR(150 MHz,CD OD)6:134.6(C一 3),179.5(C4),163.4(C-5),100.4(C一6), 2 3.85(3H,s,一OCH3),0.93(3H,d, J=6 Hz,H-6 ),0.69(3H,d,J=6.2 Hz, H-6””)。 ”C—NMR(125 MHz,DMSO—d )6:177.0 (C4), 164.7(C-7),161.0(C-5),156.4 C一2), 156.3(C-9),149.2(C一3 ),146.8 C4 ),165.9(C-7),94.6(C一8),158.5(C一2,9), 106.1(C一10),123.6(C一1 ),116.1(C一2 ), 146.2(C一3 ),149.7(C4 ),117.3(C一5 ), 123.3(C-6 ),99.8(C一1”),80.2(C一2”),79.1 132.3(C一3),122.0(C一6 ),121.0 C一1 ), 115.1(C-5 ),113.1(C-2 ),103.7(C一10), 100.8(C.1 ),100.7(C一1 ”),98.9(C-1”), 98.5(C-6),93.9(C一8),77.7(C-2 ),76.8 (C-3”),75.6(C-5”),71.6(C-4”),71.6(C一 4” ),71.6(C4””),70.5(C一2 ),70.5(C一 2 ”),70.4(C一3 ),70.3(C一3 ”),70.2(C一 5 ),70.2(C一5””),66.8(C-6”),55.6(- OCH ),17.5(C-6 ),16.9(C-6 )。以上数据 与文献[5-6]报道一致,故鉴定化合物1为香蒲 新苷。 化合物2:黄色无定形粉末。 H—NMR(600 MHz,CD OD)6:7.83(1H,d,J=2.0 Hz,H- 2),7.47(1H,dd,J=8.4,2.0 Hz,H一6), 6.90(1H,d,J=8.4 Hz,H一5),6.4O(1H,s, H一8),6.17(1H,s,H-6),5.61(1H,d,J= 7.4 Hz,H一1),4.99(1H,s,H-1 ),4.37 (1H,s,H一1””),3.85(3H,s,一OCH ),3.88~ 3.04(10H,in,糖上的质子),0.93(3H,d,J= 6.2 Hz,H-6 ” ),0.69(3H,d,J=6.2 Hz,H- 6” )013C.NMR(125 MHz,CD OD)6:178.8(C一 4),165.5(C-7),162.9(C一5),161.5(C-4 ), 157.6(C一9),157.4(C-2),134.2(C-3), 132.1(C-2 ,6 ),122.2(C一1 ),116.1(C一3 , 5 ),106.1(C一1 ”),105.3(C一10),102.1(C一 1 ),99.9(C-1”),99.7(C-6),94.5(C一8), 83.7(C一2”),78.8(C一5 ),78.3(C-5 ,3 ), 77.3(C一3”),76.0(C-2 ),73.8(C-4””),72.4 (C-3 ),72.0(C-2 ),71.2(C_4” ),71.0(C. 4”),69.5(C一5””),67.4(C-6”),62.4(C-6””), 18.4(C-6 )。以上数据与文献[7]报道一致, 故鉴定化合物2为山柰酚一3.O.B.D.葡萄吡喃糖基一 (1— )-[ot-L-鼠李吡喃糖基-(1—6)-3-D-葡萄 吡喃糖苷]。 化合物3:黄色无定形粉末。 H.NMR(600 MHz,CD3OD) :7.62(1H,s,H-6 ),7.61 (1H,d,J=2.1 Hz,H-2 ),6.86(1H,d,J= (C一3”),71.8(C4 ),78.5(C一5”),62.6(C- 6”),102.8(C-1 ),72.4(C一2 ),72.5(C・ 3” ),74.1(C4 ),70.1(C-5” ),17.6(C-6 )。 以上数据与文献[8]报道一致,故鉴定化合物3 为槲皮素一3-0一新橙皮糖苷。 化合物4:黄色无定形粉末,ESI—MS m/z:624 [M-H]一。 H—NMR(600 MHz,cD OD)6:7.99 (1H,d,J=2.0 Hz,H-2 ),7.54(1H,dd,J= 8.4,2.0 Hz,H-6 ),6.92(1H,d,J:8.4 Hz, H-5 ),6.38(1H,d,J=2.0 Hz,H一8),6.18 (1H,d,J:2.0 Hz,H・6),5.92(1H,d,J= 7.7 Hz,H一1”),5.18(1H,d,J=1.1 Hz,H一 1 ),0.86(3H,d,J=6.2 Hz,H-6 ),3.78~ 3.20(11H,In,糖上的质子)。13 C.NMR(150 MHz,CD3OD)6:158.5(C一2),134.4(C一3), 179.4(C-4),163.4(C-5),99.8(C-6),165.9 (C-7),94.7(C一8),158.3(C-9),106.1(C- 10),123.5(C一1 ),114.6(C一2 ),150.7(C- 3 ),148.5(C4 ),116.1(C-5 ),123.6(C- 6 ),100.2(C一1 ),8O.4(C-2 ),79.0(C一3”), 71.9(C4”),78.6(C-5”),62.5(C-6”),102.9 (C一1 ),72.4(C-2 ),72.5(C一3 ”),74.0(C一 4 ),70.0(C-5 ),17.5(C一6 ),57.0(3 - OCH,)。以上数据与文献[9]报道一致,故鉴定 化合物4为异鼠李素一3-0-芸香糖苷。 化合物5:黄色无定形粉末。 H.NMR(600 MHz,CD3OD)6:8.12(1H,d,J=2.0 Hz,H一 2 ),7.52(1H,dd,‘,=8.4,2.0 Hz,H-6 ), 6.90(1H,d,J=8.4 Hz,H一5 ),6.37(1H,d, J=2.0 Hz,H一8),6.16(1H,d,J=2.0 Hz,H- 6),5.90(1H,d,J=5.9 Hz,H-1”),5.15 (1H,d,.,=1.0 Hz,H一1” ),3.20~3.80(10H, m,糖上的质子),0.83(3H,d,t,=6.2 Hz,H. 6)。 C-NMR(15O MHz,CD OD)艿:158.5(C一 2),134.5(C-3),179.5(C4),163.3(C.5), 113 2017年1月 第39卷第1期 中成药 Chinese Traditional Patent Medicine January 2017 Vo1.39 No.1 99.8(C-6),165.8(C-7),94.6(C-8),158.2 (C一9),106.1(C一10),123.2(C一1 ),114.8 (C-2 ),150.6(C.3 ),148.5(C_4 ),116.0 (C-5 ),123.5(C-6 ),102.9(C一1 ),75.8(C. 2”),78.0(C一3 ),72.6(C-4”),77.3(C-5”), 62.5(C-6 ),100.7(C 1 ),70.8(C一2” ), 72.5(C-3 ),74.0(C4” ),69.9(C-5 ),l7.4 (C-6 ),57.3(一OCH )。以上数据与文献[10] 报道一致,故鉴定化合物5为3’.甲氧基槲皮素.3— 0一 —L一鼠李吡喃糖基.(1—6) B-D一葡萄吡喃 糖苷。 化合物6:白色无定形粉末。 H-NMR(400 MHz,CD OD)8:7.42(2H,d,J=7.4 Hz,H一 2,6),7.33(2H,t,J=7.4 Hz,H一3,5), 7.27(1H,in,H_4),4.94(1H,d,J=11.8 Hz,I-I-Ta),4.66(1H,d,-,=11.8 Hz,H-7b), 4.35(1H,d,J:7.7 Hz,H一1 ),3.89(1H,d, J=11.6 Hz,H一6 a),3.69(1H,dd,J=11.9, 5.3 Hz,H一6 b),3.39~3.21(4H,in,H_2, ̄5 )。 ”C—NMR(100 MHz,CD3OD)8:138.1(C一1), 128.3(C一2,6),128.2(C一3,5),127.7(C- 4),102.3(C-1 ),77.1(C-5 ),77.0(C一3 ), 74.2(C一2 ),70.7(C-7),70.7(C-4 ),61.8 (C-6 )。以上数据与文献[11]报道一致,故鉴 定化合物6为苄醇一B.D.葡萄糖苷。 化合物7:金黄色针状晶体(氯仿),mp 203~ 204℃。 H.NMR(500 MHz,CDC1 ) :12.33 (1H,s,8-OH),12.13(1H,S,1一OH),7.64 (1H,s,H4),7.38(1H,d,J=2.5 Hz,H一 5),7.10(1H,s,H一2),6.70(1H,d,J=2.5 Hz,H-7),3.96(3H,s,一OCH3),2.47(3H, s,3-CH3)。”C-NMR(125 MHz,CDC13)6:190.8 (C一9),182.0(C一10),166.6(C・8),165.2(C- 1),162.5(C-6),148.5(C一3),135.3(C一 10 o【),133.2(C_4仅),124.5(C4),121.3(C一 2),113.7(C-9仅),110.3(C-8 ),108.2(C- 5),106.8(C-7),56.1(.OCH,)。以上数据与 文献[12]报道一致,故鉴定化合物7为大黄素. 6一甲醚。 化合物8:白色针状晶体(甲醇),mp 263— 263 ,易溶于乙酸乙酯、丙酮、乙醇和甲醇。 H. NMR(500 MHz,DMSO—d6) :9.56(1H,s,H一 4 ),9.21(2H,s,H-3,5),7.40(2H,d,J= 8.6 Hz,H一2 ,6 ),6.94(1H,d,J=16.3 Hz, 1 14 H-8),6.82(1H,d,J=16.3 Hz,H一7),6.76 (2H,d,J=8.6 Hz,H一3 ,5 ),6.39(2I-/,d, J=2.1 Hz,H一2,6),6.13(1H,d,J:2.1 Hz, H_4)。”C-NMR(125 MHz,DMSO—d ) :159.0 (C-3,5),157.7(C4 ),139.7(C.1),128.5 (C一1 ),128.3(C-2 ,6 ),126.1(C・7,8), 116.0(C-3 ,5 ),104.8(C-2,6),102.2(C一 4)。以上数据与文献[13]报道一致,故鉴定化 合物8为白黎芦醇。 化合物9:白色针状结晶(甲醇),mp 233~ 235℃。ESI—MS m/z:290『M+Na] 。 H—NMR (400 MHz,C5D5N)8:8.77(1H,s,H一8), 8.64(1H,s,H一2),8.52(2H,S,-NH2),6.76 (1H,d,J=5.9 Hz,H一1 ),5.53(1H,d,J= 5.4 Hz,H-2 ),5.08(1H,nl,H-3 ),4.79 (1H,m,H_4 ),4.33(1H,dd,J=12.4,2.4 Hz,H一5 a),4.16(1H,dd,J=12.4,2.3 Hz, H-5 b)。”C—NMR(100 MHz,C D N) :153.8 (C一2),150.2(C-4),122.0(C-5),158.2(C一 6),141.1(C一8),91.3(C一1 ),76.1(C一2 ), 72.9(C-3 ),88.3(C_4 ),63.5(C-5 )。以上 数据与文献[14—15]报道一致,故鉴定化合物9 为腺嘌呤核苷。 化合物1O:白色无定形粉末,ESI—MS m/z: 243[M_H]一。 I-I—NMR(500 MHz,CD3OD)6: 7.99(1H,d,J:7.9 Hz,H-6),5.89(1H,d, J=4.3 Hz,H一1 ),5.70(1H,d,J:7.9 Hz,H一 5),4.18(1H,nl,H-3 ),4.14(1H,m,H一 2 ),4.00(1H,m,H4 ),3.79(2H,m,H- 5 )。 C—NMR(125 MHz,CD OD)占:152.6(C- 2),166.3(C_4),102.8(C一5),142.9(C一6), 9O.7(C一1 ),71.4(C一2 ),75.8(C一3 ),86.4 (C-4 ) 62.4(C-5 )。以上数据与文献[16]报 道一致,故鉴定化合物10为尿嘧啶核苷。 化合物11:无色针状晶体(甲醇),mp 253— 253 ℃。 H.NMR(500 MHz,CD OD)6:7.63 (1H,s,H4 ),7.57(1H,S,H-7 ),7.35 (1H,s,H-2 ),7.20(1H,S,H-5 ),7.12 (1H,d,J=7.5 Hz,H-6 ),3.90(1H,S,H一 2),3.43(1H,d,J=7.2 Hz,H一3a),3.35 (3H,s,一OCH3),3.27(1H,d,J=7.2 Hz,H一 3b)。 C—NMR(125 MHz,CD3OD)6:171.2(C一 1),80.0(C一2),24.1(C一3),124.6(C-2 ), 108.4(C.3 ),127.7(C-3 a),118.5(C_4 ), 2017年1月 中成药 Chinese Traditional Patent Medicine January 2017 Vo1.39 No.1 第39卷第1期 119.5(C-5 ),122.1(C-6 ),111.9(C一7 ), 参考文献: [1] 郑良永.海南岛火龙果丰产栽培技术[J].热带农业科学, 2004,24(4):3641. 137.5(C-7 a),52.1(一OCH )。以上数据与文献 [17]报道一致,故鉴定化合物11为2一甲氧基-3一 (3 .吲哚基) 丙酸。 [2] 田新民,李洪立,何云,等.火龙果研究现状[J].北方 化合物12:白色针状结晶(乙酸乙酯),mp 166~168℃ H.NMR(500 MHz,CDC1 ) :5.34 园艺,2015(18):188—193. 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