中国组织工程研究与临床康复 ７４ 掰２３ ２０１０—０６—０４出版 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｖｅ Ｔ￣ｓｕｅＥｎｇｍｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈ Ｊｕｎｅ４，２０１０ ＶｏＬ１４，Ｎｏ．２３ 第４代大鼠脂肪间充质干细胞的免疫表型鉴定术术☆ 李东飞，杨春，李桢，戴景兴，原林 Ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｔ ｐａｓｓａｇｅ ４ Ｌｉ Ｄｏｎｇ－ｆｅｉ，Ｙａｎｇ Ｃｈｕｎ，Ｌｉ Ｚｈｅｎ，Ｄａｉ Ｊｉｎｇ‘ｘｉｎｇ，Ｙｕａｎ Ｌｉｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ ＢＡＣＫＧＲＯＵＮＤ：Ｍａｎｙ ｓｔｕｄｉｅｓ ｈａｖｅ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｔｈａｔ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ（ＡＤＭＳＣｓ）ｃａｎ ｂｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ａｔ ｐａｓｓａｇｅ １ ０．ＡＤＭＳＣｓ ｇｒｅｗ ｗｅｌｌ ｌｂｕｔ ｔｈｅｉｒ ｓｕ ｒｆａｃｅ ｍａｒｋｅｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｓ． ０ＢＪＥＣＴＩＶＥ：Ｔｏ ｉｓｏｌａｔｅ ａｎｄ ｃｕｌｔｉｖａｔｅ ｒａｔ ＡＤＭＳＣｓ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ａｔ ｐａｓｓａｇｅ ４． ＭＥＴＨ０ＤＳ：ＡＤＭＳＣｓ ｏｆ ｓｉｘ Ｓｐｒａｇｕｅ—Ｄａｗｌｅｙ ｒａｔｓ ｆｒＯｍ ｉｎｇｕｉｎａｌ ｆａｔ ｐａｄｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ａｎｄ ｃｕｌｔｕｒｅｄ Ａｄｈｅｒｅｎｔ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｔ川ｐａｓｓａｇｅ ４．Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ＡＤＭＳＣｓ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｕｎｄｅｒ ａ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｔｒａｓｔ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｍａｒｋｅｒｓ ｉｎｃＩｕｄｉｎｇ ＣＤ１ １ ｂ．ＣＤ２９，ＣＤ４５，ＣＤ４９ｄ，ＣＤ９０ ａｎｄ ＣＤ１ ０６ ｏｆ ＡＤＭＳＣｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｕｓｉｎｇ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ． ＲＥＳＵＬＴＳ ＡＮＤ ＣＯＮＣＬＵＳｌＯＮ：Ｒａｔ ＡＤＭＳＣｓ ｓｈｏｗｅｄ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｉｃ—ｌｉｋｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ａｎａｔｏｍｙ， Ｓｏｕｔｈ ＭｅｄｉｃａＩ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０５１５，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ．Ｃｈｉｎａ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｒａｔ ＡＤＭＳＣｓ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｏｒ ＣＤ２９ ａｎｄ ＣＤ９０，ｂｕｔ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｆｏｒ ＣＤ１ １ ｂ，ＣＤ４５，Ｃ：Ｄ４９ｄ ａｎｄ ＣＤ１ ０６． Ｔｈｅ ｒａｔ ＡＤＭＳＣｓ ｃａｎ ｂｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｅｎｚｙｍｅ—ｂａｓｅｄ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔ ＡＤＭＳＣｓ ｉｓ ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｌ ｗｉｔｈ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ． Ｌｊ ＤＦ，Ｙａｎｇ Ｃ，Ｌｉ Ｚ，Ｄａｉ ＪＸ，Ｙｕａｎ Ｌ＿ｌｍｍｕｎＯｐｈｅｎ０ｔｙｐｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｌ Ｌｉ Ｄｏｎｇ—ｆｅｉ☆． Ｓｔｕｄｙｉｎｇ ｆｏｒ ｄｏｃｔｏｒａｔｅ，Ａｔｔｅｎｄｉｎｇ ｐｈｙｓｉｃｉａｎ， Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ａｎａｔｏｍｙ， Ｓｏｕｔｈ ＭｅｄｉｃａＩ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０５１５，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ ｐａｓｓａｇｅ ４．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ Ｚｕｚｈｉ Ｇｏｎｇｃｈｅｎｇ Ｙａｎｊｉｕ ｙｕ Ｕｎｃｈｕａｎｇ Ｋａｎｇｆｕ。２０１０；１４（２３）：４２０７・４２１０． ［ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｒｔｅｒ．ｃｎ ｈ￣ｐ：Ｅｅｎ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｍ】 摘要 ｍｚｌｉｄｏｎｇｆｅｉ＠１２６ ｃｏｍ 背景：有文献证实以酶消化法可获得在脂肪组织间充质干细胞，传至第１Ｏ代时细胞生长仍良好，但表面标志物表达下降。 目的：分离培养大鼠脂肪组织间充质干细胞，传代至第４代，检测免疫表型 方法：从６只ＳＤ大鼠腹股沟脂肪垫中分离培养脂肪组织间充质干细胞，以贴壁细胞扩增传代至第４代。相差显微镜下观 Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ ｔｏ： Ｙｕａｎ Ｌｉｎ．Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ａｎａｔｏｍｙ， Ｓｏｕｔｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０５１５，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ ｙｕａｎＩ＠ ｍｍｕ ｃｏｍ 察脂肪组织间充质干细胞的形态，并用流式细胞术鉴定脂肪组织间充质干细胞的表面标志物ＣＤ１ １ｂ，ＣＤ２９，ＣＤ４５，ＣＤ４９ｄ， ＣＤ９Ｏ和ＣＤ１Ｏ６的表达率。 结果与结论：大鼠脂肪组织间充质干细胞呈现类似成纤维细胞样形态学特征，免疫表型分析显示ＣＤ２９和ＣＤ９０呈阳性， 而ＣＤ１ １ ｂ、ＣＤ４５、ＣＤ４９ｄ和ＣＤ１ ０６娶阴性反应 结果提示通过这种酶消化法获得的ＳＤ大鼠的脂肪组织间充质干细胞， 免疫表型分析显示符合间充质干细胞的特征 关键词：脂肪组织；脂肪间充质干细胞：免疫表型：大鼠：细胞鉴定 ｄｏｉ：１０ ３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—８２２５．２０１０．２３．００７ Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ：ｔｈｅ ＮａｔｉｏｎａＩ Ｂａｓｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒ０ａｒａｍ （９７３ Ｐｒｏｇｒａｍ）ｏｆ 夺东飞，杨春，李桢，戴景兴，原林．第４代大鼠脂肪间充质干细胞的免疫表型鉴定［Ｊ】．中国组织工程研究与临床康复，２０１０ １ ４（２３）：４２０７－４２１ ０． 【ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｒｔｅｒ．ｏｒｇ ｈ￣ｐ：ｄｃｎ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｒｎ】 Ｃｈｉｎａ， Ｎｏ ２００７ＣＢ５１ ２７０５＊， ｔｈｅ Ｙｏｕｔｈ Ｓｃｉｅｎｅｅ Ｐｒｏｇｒａｍ ｏｆ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａ１ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ， Ｎｏ ３０８０１４６４＊ 研究，并鉴定了部分表面标志［１１－’ 。实验从ＳＤ ０ 引言 大鼠的腹股沟脂肪垫分离培养ＡＤＭＳＣｓ，并对 这种问充质干细胞的表面标志ＣＤ１１ｂ，ＣＤ２９， ＣＤ４５，ＣＤ４９ｄ，ＣＤ９０￣ＮＣＤ１０６的表达率进行 Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２Ｏ０９—１２—１５ Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２０１０－０２．ｏ１ 目前已经从多种组织中分离出问充质干 细胞，包括骨髓、脂肪、脐带血等 １－５ｊ ｏ近年来 分析，得到了ＳＤ大鼠来源的ＡＤＭＳＣｓ的部分免 疫表型。 对脂肪问充质干细胞（ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ，ＡＤＭＳＣｓ）的研究证 实，在特定的诱导条件下ＡＤＭＳＣｓ能够分化为 肌细胞、成骨细胞、神经细胞等各种细胞ｐ Ｊ， １材料和方法 在细胞移植治疗中具有重要价值。作为细胞移 植的种子细胞之一，ＡＤＭＳＣｓ具有取材手术痛 莆小、可重复进行、酶消化分离程序简单等优 点，吸引了众多研究者的兴趣 。ｕＪ。在ＡＤＭＳＣｓ 设计：细胞学体外观察实验。 时间及地点：于２００８－１２１２００９—０５在南方医 科大学人体解剖学实验室完成。 材料：２月龄ＳＰＦ级ＳＤ大鼠６只，体质量 进行人体实验之前，进行详细的动物试验来验 证其安全性和有效性是必须的。目前国内外对 人类和几个种属实验动物的ＡＤＭＳＣｓ进行了 ｜ＳｓＮ １６７３—８２２５ ｃＮ ２１－１５３９／Ｒ ｃＯＤＥＮ：ＺＬＫＨＡＨ ２００～２２０ ｇ，雌雄不拘，由南方医科大学实验动 物中心提供，许司‘证号：ＳＣＸＫ粤２００６－００１５。 实验过程中对动物处置符合２００６年科学技术部 ４２０７ ７ 南方医科大学人 体解剖学教研室 广东省广州市 ５１０５１５ ｃＲ瑚．ｏｒｇ 发布的《关于善待实验动物的指导性意见》Ｈ３｝。 主要试剂及仪器： 夸末飞，等．第４代大鼠鞲麟阊充质于钮瓶的免疫襄墅鉴定 ２．２ ＡＤＭＳＣｓ的形态 ＳＤ大鼠腹股沟脂肪垫 来源的各代ＡＤＭＳＣｓ在倒置显微镜下观察，经 过传代后细胞形态逐渐均一，类似成纤维细 来源 Ｇｉｂｃｏ，美国 Ｓｉｇｍａ，美闺 李东飞☆，男， １９７２年生，河南 省孟州市人，汉 Ｅ要试剂及仪器 Ｈ—ＤＭＥＭ、胎牛血清、胰蛋白酶 ｌ型胶原酶 胞，多呈长梭型或者纺锤形，间有不规则型和 ｉ角形，见图１。 族，南方医科大学 在读博士，主治医 师，主要从事间充 质干细胞的基础 与应用研究。 ｍｚｌｉｄｏｎｇｆｅｉ＠ １２６．ｃｏｍ一 小鼠单克隆抗大鼠ＣＤ１１ｂ，ＣＤ２９、 ＣＤ４５、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ９０和ＣＤ１Ｏ６ Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，美国 Ｓｉｇｍａ。美国 通讯作者：原 林，教授，南方医 低温离心机 科大学人体解剖 学教研室，广东省 广 州 市 ５１０５１５ Ｈｅｒａｅｕｓ二氧化碳培养箱 倒置相差显微镜 ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ流式细胞仪 Ｔｈｅｒｍｏ，德陶 Ｏｌｙｍｐｕｓ，Ｆ１本 ＢＤ，美囤 ｙｕａｎｔ＠ ｍｍｕ． ＣＯｍ 实验方法： ＡＤＭＳＣｓ的分离培养： １ Ｏ％水合氯醛３ ｍＬ／ｋｇ 中图分类号：Ｒ３９４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－８２２５ （２０１０ｌ２３－０４２０７－０４ 收稿日期：２００９．１２ １５ 修回日期：２０１０－０２—０１ 腹腔注射麻醉后，无菌条件下切取腹股沟脂肪 垫。手术显微镜下清除小血管，ＰＢＳ液冲洗３次， 眼科剪剪碎成约１ ｍｍ×１ ｍｍ×１ ｍｍ大小，加 入２倍体积的１．５ ｇ／Ｌ的Ｉ型胶原酶，３７℃下间 断振荡消化４０ ｍｉｎ后用等量的含体积分数为 １０％胎牛血清的ＤＭＥＭ中和，１ ２００ ｒ／ｍｉｎ离心 １ ０ ｍｉｎ，去除上清，用含体积分数为１ ０％胎牛血 清、１％青霉素／链霉素的ＤＭＥＭ重悬细胞，２００ 目筛网过滤，以８ ０００—１０ ０００／ｃｍ 的密度接种 于２５ ｃｍ 培养瓶，放置于３７℃，体积分数为５％ ＣＯ２的培养箱中培养。１ ｄ后换液，以后每３ ｄ换 ｛２００９１２１５０１９／ Ｗ Ｄ１ 液１次，至长满８Ｏ％瓶底时用１。５ ｇ／Ｌ胰蛋白酶／ ０．Ｏ２％ＥＤ 消化后按照１：３传代，倒置相差显 微镜下观察照相。 流式细胞术检测第４代ＡＤＭＳＣｓ表面标志：取 第４代ＡＤＭＳＣｓ，按照每管１ ０ 个细胞离心，ＰＢＳ 重悬，分别和ＡＰＣ标记的小鼠单克隆抗大鼠 ＣＤ１１ｂ、ＣＤ２９，ＰＥ标记的小鼠单克隆抗大鼠 ＣＤ４５、ＣＤ１ ０６，ＦＩＴＣ标记的小鼠单克隆抗大鼠 ＣＤ４９ｄ、ＣＤ９０孵育２０ ｍｉｎ，加入含体积分数为 ５％胎牛血清的ＰＢＳ离心重悬２次，后用流式细胞 仪检测４种表面标志的表达率。 主要观察指标：ＡＤＭＳＣｓ的细胞形态以及６ 种表面标志的表达率。 设计、实施、评估者：设计、实施、评估为 全体作抒，均经过南方医科大学正规培训。 ２结果 丧１ 第４ｔ ＳＤ大鼠ＡＤＭＳＣｓ流式细胞仪愉测结 果，以各抗原的阳性细胞百分率表示 Ｔａｂｌｅ １ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｆｒ０ｍ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ ｒａｔｓ ａｔ ｐａｓｓａｇｅ ４ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ ａｓ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ２．３ 第４代ＡＤＭＳＣｓ表面标志的表达率ＳＤ 大鼠第４代ＡＤＭＳＣｓ中ＣＤ２９和ＣＤ９０呈舟表 达，ＣＤ１１ｂ、ＣＤ４５、ＣＤ４９ｄ和ＣＤ１Ｏ６表达率 较低，见表１和图２。 ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｓｕｒｆａｃｅ ｍａｒｋｅｒ ＣＤ１１ｂ ＣＤ２９ ＣＤ４５ ＣＤ４９ｄ ＣＤ９０ （肚ｓ１ Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｉｌｓ（％） ３．７土３．１ ９９．５＿－＊－０．９ １．８，ｚ０．８ ２．４：ｔ．４ ５ ９２１±２．６ ２．１ ＡＤＭＳＣｓ的分离培养 原代细胞经过约 ９ ｄ后长满８０％瓶底，胰蛋白酶消化后传代，每 ＣＤ１ ０６ ２．５±２．２ ３ ｄ传１代，生长迅速，稳定传代至第１ Ｏ代细胞传 代时问未见明显变化。 尸０ Ｂｏｘ １２００，Ｓｈｅｎｙａｎｇ ７１０００４ ｃｎ．ｚｇｌｃｋｆ，ｃｏｍ 李东飞．等．第４代大鬣糖魏阃充质干细匏的免疫表塑鎏定 奉Ｌ是ＡＤＭＳＣｓ 引。有研究表明经过数次（三四次）传代 后，砒占壁细胞【ｌ｝】的造血系细胞标志物￣Ｉ：ＩＣＤ１ １、ＣＤ１ ４和 ＣＤ４５的表达率逐渐下降，而问充质细胞标记物如 ＣＤ２９、ＣＤ９０￣ＨＣＤ１０５等逐渐达到稳定的高水 表达， 细胞呈现高度的同质性【 ’ Ｊ。实验对ＳＤ大鼠的 ＡＤＭＳＣｓ的免疫表型鉴定所采用的细胞是第４代细胞。 目前证实ＡＤＭＳＣｓ的干细胞性质多采用多向诱导 分化和鉴定表面标志相结合的方法，但没有证明其具有 特异性的农面标志物。实验中获取的ＡＤＭＳＣｓ的表面标 志的特点证实了其问充质干细胞的特性。研究发现， ＡＤＭＳＣｓ作为问充质干细胞的一种，ＣＤ２９￣ＮＣＤ９０麻陔 呈阳性表达 卅，实验中从ＳＤ大鼠获得的ＡＤＭＳＣｓ ｒ｝， ＣＤ２９￣ＨＣＤ９０具有相似的高表达率。在造血干细胞Ｌ｝１高 表达的ＣＤ１１ｂ、ＣＤ４５在两种ＡＤＭＳＣｓ表达率极低，证 明其不是造血＝ｉＩ细胞来源，与Ｓａｆｆｏｒｄ等 圳报道的检测结 果相一致。火于ＣＤ４９ｄ在ＡＤＭＳＣｓ中的表达率，Ｉ司内外 文献报道有很大差异，从阴性表达到强阳性表达均有报 道［２６＿ 。实验ｑ：￣ＣＤ４９ｄ的表达率很低，与Ｗａｇｎｅｒ等【２７］ ３讨论 的报道一致，产乍这种差异的原因尚不清楚，町能和选 择动物的种系有关。在ＡＤＭＳＣｓ中不戍 表达的内Ｊ支细 胞标记物ＣＤ１ ０６，在本实验中也是极低表达，与Ｄａｎｉｅｌ 的报道相一‘致 …。ＣＤ１１ｂ、ＣＤ４５、ＣＤ４９ｄ和ＣＤ１０６ 作为问充质干细胞的一种， ＡＤＭＳＣｓ为机体提供 了重要干细胞储备，具有容易获取、含量较大、具有免 疫抑制作用等优 。４ 引，为细胞移植治疗提供了新的细 胞来源，并进行了相关的移植应用研究，取得了一定效 果［１６＿ 】。相关研究对人类、马、兔、小鼠等物种获取的 ＡＤＭＳＣｓ的部分表面标志进行ｒ鉴定，对这种问充质干 细胞免疫表型有了初步了解。 目前从脂肪组织巾获取ＡＤＭＳＣｓ的方法在不同的 文献中略有差异，但是基本方法都足酶消化的方法，经 过离心后将获得的问质血管碎片种植于塑料培养皿中， 用含体积分数为１０％胎牛血清的ＤＭＥＭ培养，将贴壁细 在本实验所检测的第４代ＡＤＭＳＣｓ中的仍然有低表达 率，说明ＡＤＭＳＣｓ在传到第４１＇－￣时没有达到完全纯化。 ２００６年国际细胞治疗协会就问充质下细胞的表面 标志达成了共ｉ５｛，认为在人体问充质干细胞的几种表【＝ＩＩｉ 标志中，ＣＤ９０表达率应大于９５％，ＣＤ１１ｂ、ＣＤ４５的农 达率』、 低于２％ 。实验中ＣＤ９０￣ＩＩＣＤ４５的表达率符合 这种特征，ＣＤ１１ｂ的表达率（３．７±３．１）％虽略高于２％，但 也是低水 表达，与造血干细胞中的高表达明显不同。 影响ＡＤＭＳＣｓ表面标志的因素有很多。有研究证实 人体不同皮 脂肪组织中用不同的方法获取的 ＡＤＭＳＣｓ有不同 ，从致密骨获得的ＡＤＭＳＣｓ和从Ｊ支下 获得的ＡＤＭＳＣｓ的免疫表型也有差异【］ 。另外机体不同 部位和不同年龄对分离培养的ＡＤＭＳＣｓ都有影响。有研 究表明，即使同在皮下组织，白色脂肪和褐色脂肪的 ＡＤＭＳＣｓ也不尽相 ，兔性腺来源的ＡＤＭＳＣｓ和皮下 组织来源的ＡＤＭＳＣｓ成骨能力也存在不同 ｊ。对各种物 种ＡＤＭＳＣｓ免疫表型的深入研究对其实际应用具有重 要价值。 胞传代后获得ＡＤＭＳＣｓ 。实验采用的方法是在这种基 本方法的基础经过多次探索后获得的，符合ＡＤＭＳＣｓ的 分离和培养方法，能稳定地获得ＳＤ大鼠的ＡＤＭＳＣｓ， 传至第１Ｏ代时细胞仍生长良好迅速，传代时问未见延 长，经过传代后细胞形态逐渐均一‘，呈类似成纤维细胞 的形态特征。 用消化离心的方法获得的问质血管碎片中含有多 种细胞，包括内皮细胞、 滑肌细胞、周细胞、成纤维 细胞以及血液循环系统的细胞等 训。有一种观点认为由 于ＡＤＭＳＣｓ具有在 料培养Ⅲ【表面贴附的特性，所以在 经过在塑料培养皿中种植后ＡＤＭＳＣｓ能被直接从问质 血管碎片中筛选出来，之后的传代细胞能被直接用来进 行实验，并认为这些贴壁细胞就是ＡＤＭＳＣｓ 。另…种 ４参考文献 ｆ１ １ Ｋｏｇｌｅｒ Ｇ Ｓｅｎｓｋｅｎ Ｓ，Ａｉｒｅｙ ＪＡ，ｅｔ ａ１．Ａ Ｆｌｅｗ ｈｕｍａｎ ｓｏｍａｔｉｃ Ｓｆｅｍ ｃｅｌｌ ｆｒ０ｍ ｐｌａｃｅｎｔａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｗｉｔｈ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ 更为普遍的观点认为 仅仅是ＡＤＭＳＣｓ具有贴壁的特 性，包括成纤维细胞存内的其他细胞也具有这种性质， 贴壁细胞经过数次传代后逐渐被纯化，获得的细胞才基 ｜ｓＳＮ １６７３－８２２５ ＣＮ ２１－１ ５３ Ｒ ｃｏＤＥＮ：ＺＬＫＨＡＨ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａ１．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．２００４；２００（２）：１２３－１３５． 『２１ Ｂａｋｓｈ Ｄ，Ｙａｏ Ｒ，Ｔｕａｎ ＲＳ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｎｄ ｍｕｌｔｉｌｉｎｅａｇｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒ０ｍ ｕｍｂｉｌｉｃａＩ ｃｏｒｄ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ． ２００７；２５（６）：１ ３８４．１ ３９２． ｗ ｃ舟 ｒｇ 李东飞．等 第４代大鼠 ％盼阃充羲于细瓶韵免疫裹鸷鉴定 【２７］ Ｗａｇｎｅｒ Ｗ，Ｗｅｉｎ Ｆ－Ｓｅｃｋｉｎｇｅｒ Ａ，ｅｔ ａＩ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｆｒＯｍ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ，ａｄｉｏｓｅ ｐ【３］ Ｌｕ ＬＬ．Ｓｏｎｇ Ｙ尸，Ｗｅｉ ＸＤ，ｅｔ ａＩ．ｆＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａＩ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｆｒＯｍ ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａＩ ｃｏｒｄ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ Ｓｈｉ Ｙａｎ Ｘｕｅ Ｙｅ Ｘｕｅ Ｚａ Ｚｈｉ．２００８；１６（１）： ｔｉｓｓｕｅ，ａｎｄ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ．Ｅｘｐ ＨｅｍａｔｏＩ．２００５；３３（１１）： １４０２—１４１６． 【４】 ［５】 １４０－１４６． Ｚｕｋ Ｐ Ａ，Ｚｈｕ Ｍ。Ｍｉｚｕｎｏ Ｈ，ｅｔ ａＩ．Ｍｕｌｔｉｌｉｎｅａｇｅ ｃｅｌｌｓ ｆｒＯｍ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｃｅｌｌ－ｂａｓｅｄ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ．￣ｓｓｕｅ Ｅｎｇ ｆ２８１ Ｄｅ ＵＤ，ＡＩｆｏｎｓｏ Ｚ，Ｚｕｋ ＰＡ，ｅｔ ａｌ ＤｉｆｅｒｅｎｔｉａＩ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｍ ｃｅｌ Ｉｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｏｌｃｕｌｅｅｓ ｏｎ ｍｕｌｔｉ—ｌｉｎｅａｇｅ ｃｅｌｌｓ ｆｒＯｍ ２００１：７（２）：２１ １・２２８． Ｄｈａｒ Ｓ，Ｙｏｏｎ ＥＳ，Ｋａｃｈｇａ Ｊ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ｏｆ ｎｅｕｒｏｎａｌｌｙ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｅｍ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ．１ｍｍｕｎ０Ｉ Ｌｅｔｔ．２００３；８９（２—３１： ２６７—２７０． ｃｅｌｌｓ．＂３ｉｓｓｕｅ Ｅｎｑ．２００７；１ ３（１ １）：２６２５－２６３２． Ｈａｙａｓｈｉ Ｏ．Ｋａｔｓｕｂｅ Ｈｉｒｏｓｅ Ｍ，ｅｔ ａＩ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ 【６】 ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｒａｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａＩ ｓｔｍ ｃｅｌｅｌｓ ｆｒＯｍ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ． 『２９］ Ｍｅｓｉｍａｋｉ Ｋ．Ｌｉｎｄｒｏｏｓ Ｂ，Ｔｏｒｎｗａｌ ＩＪ，ｅｔ ａＩ Ｎｏｖｅｌ ｍａｘｉｌｌａｒｙ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｅｃｔｏｐｉｃ ｂｏｎｅ ｆＯｒｍａｔｉｏｎ ｂｖ ＧＭＰ ａｄｉｐｏｓｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．１ｎｔ Ｊ ＯｒａＩ Ｍａｘｉｌｌｏｆａｃ Ｓｕｒｇ．２００９；３８（３）：２０１－２０９． ｆ３０１ ｄｅ Ｕｇａｒｔｅ ＤＡ，ＡＩｆｏｎｓｏ Ｚ，Ｚｕｋ ＰＡ，ｅｔ ａＩ ＤｉｆｅｒｅｎｔｉａＩ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｍ ｃｅｌＩ ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｏｎ ｍｕｌｔｉ－ｌｉｎｅａｇｅ ｃｅｌｌｓ ｐｅｒｉｏｓｔｅｕｍ，ａｎｄ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ．Ｃａｌｃｉｆ Ｔｉｓｓｕｅ Ｉｎｔ．２００８；８２（３）： ２３８—２４７． Ｌｉｎ Ｃｈｅｎ Ｘ，Ｙａｎ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｍｕｌｔｉｌｉｎｅａｇｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｒｏｍａＩ ｃｅｌｌｓ ｆｒ０ｍ ＧＦＰ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ ＭｏＩ Ｃｅｌ ｌｆｒｏｍ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ．ＪｍｍｕｎｏＩ Ｌｅｔｔ．２００３；６９（２－３）： ２６７－２７０． 『３１ １ Ｄｏｍｉｎｉｃｉ Ｍ，Ｌｅ Ｂ Ｋ．Ｍｕｅｌｌｅｒ ｌ，ｅｔ ａ１．ＭｉｎｉｍａＩ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ ｄｅｆｉｎｉｎｇ ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａＩ ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａＩ Ｓｏｃｉｅｔｙ 【８】 【９】 Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００６；２８５（１－２１：６９－７８． Ｓｃｈａｆｆｌｅｒ Ａ，Ｂｕｃｈｌｅｒ Ｃ．Ｃｏｎｃｉｓｅ ｒｅｖｉｅｗ：ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ—ｂａｓｉｃ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｎｏｖｅＩ ｃｅｌｌ－ｂａｓｅｄ ｆｏｒ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ ｐｏｓｉｔｉｏｎ ｓｔａｔｅｍｅｎｔ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ．２００６；８（４１： ３１５—３１７． ｔｈｅｒａｐｉｅｓ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ．２００７：２５（４）：８１８－８２７． Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ Ａ Ｍ．Ｅｌａｂｄ Ｃ．Ａｍｎ Ｅ Ｚ．ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ ［３２］Ｏｅｄａｙｒａｊｓｉｎｇｈ－Ｖａｒｍａ ＭＪ，Ｖａｎ ＨＳ，Ｋｎｉｐｐｅｎｂｅｒｇ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌＩ ｙｉｅｌｄ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｒｅ ａｆｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｈａｒｖｅｓｔｉｎｇ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ． ｔｉｓｓｕｅ ｉｓ ａ ｓｏｕｒｃｅ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ，２００５；８７（１）： １２５—１２８． Ｎａｋａｇａｍｉ Ｈ，Ｍｏｒｉｓｈｉｔａ Ｒ，Ｍａｅｄａ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ 【１０】 ｓｔｒｏｍａＩ ｃ８ｌｌｓ ａｓ ａ ｎｏｖｅＩ ｏｐｔｉｏｎ ｆｏｒ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｃｅｌＩ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｊ Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ．２００６；８（２１：１ ６６－１ ７７． 『３３１ Ｐｒｕｎｅｔ－Ｍａｒｃａｓｓｕｓ Ｂ，Ｃｏｕｓｉｎ Ｂ，Ｃａｔｏｎ Ｄ，ｅｔ ａＩ．ＦｒＯｍ ｈｅｔｅｒＯｇｅｎｅｉｔＶ ｔ０ ｐＩａｓｔｉｃｉｔＶ ｉｎ ａｄｉｐＯｓｅ ｔｉｓｓｕｅｓ：ｓｉｔｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ．２００６；１ ３（２）：７７—８１． ｄｅ Ｍａｔｔｏｓ ＣＡ。ＡＩｖｅｓ ＡＬ，Ｇｏｌｉｍ ＭＡ，ｅｔ ａ１．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａＩ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒ０ｍ ｅｑｕｉｎｅ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ．Ｖｅｔ ＩｍｍｕｎＯＩ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ．Ｅｘｐ ＣｅｌＩ Ｒｅｓ．２０Ｏ６：３１２（６）：７２７－７３６． 『３４１ Ｐｅｐｔａｎ ＩＡ．ＨＯｎｑ Ｌ，ＭａＯ ＪＪ．Ｃ０ｍｐａｒｉｓ０ｎ Ｏｆ ０ｓｔｅＯｇｅｎｉｃ ｐ０ｔｅｎｔｉａＩｓ Ｏｆ ｖｉｓｃｅｒａＩ ａｎｄ ｓｕｂｃｕｔａｎｅＯｕｓ ａｄｊＤｏｓｅ－ｄｅ ｒｉｖｅｄ ｃｅＩｌｓ Ｏｆ ｒａｂｂｉｔｓ． ＰＩａｓｌ Ｒｅｃ０ｎｓｌｒ Ｓｕｒｑ．２ｏｏ６：１１ ７（５）：１ ４６２－１ ４７０． Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏ１．２００９；１ ３２（２－４）：３０３－３０６． ｋ ＪＢ，ｅｔ ａＩ。Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ［１２】 Ｓｕｎｇ ＪＨ．Ｙａｎｇ ＨＭ，Ｐａｒｏｆ ｍｏｕｓｅ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．２００８；４０（８）： ［１３］ ２６４９－２６５４． Ｔｈｅ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ Ｏｆ Ｃｈｉｎａ．Ｇｕｉｄａｎｃｅ Ｓｕｇｇｅｓｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｃｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ．２００６—０９—３Ｏ． 来自本文课题的更多信息一 岔施功：课题受国家重点基础研究计划（９７３计划）项 中华人民共和国科学技术部．关于善待实验动物的指导‘ 意见． ［１４】 ２００６－０９－３０． Ｐｏｚｚｏｂｏｎ Ｍ．Ｐｉｃｃｏｌ ｉＭ。Ｄｉｔａｄｉ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｃａｎ ｂｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒＯｍ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ＣＤ１ ３３＋ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ 目（２Ｏ０７ＣＢ５１２７Ｏ５）和国家自然科学基金青年科学基金项 目（３０８Ｏ１４６４）资助 ｔｈｅｒａｐｙ．ｔｅｍ ＣｅｌＳｌｓ Ｄｅｖ．２００９；１ ８ｆ３）：４９７－５１ ０． ｎｄｓｏｒ Ｊ，Ｄｕｎｂａｒ ＰＲ．Ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｅｍ 【１５】 Ｌｏｃｋｅ Ｍ，Ｗｉｃｅｌｌｓ：ｉｓｏｌａｔｉｏｎ．ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｓｕｒｇｅｒｙ．ＡＮＺ Ｊ 溉无其他利益冲突 提题移害 ：对脂肪组织间充质干细胞的免疫表型鉴定 有利于对其应用实验中出现的问题进行解释。实验从ＳＤ大 Ｓｕｒｇ．２００９；７９（４）：２３５－２４４． ｔｉｎｅｚ ＴＮ，Ｒｕｈｎ ＫＡ，ｅｔ ａＩ．Ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｓ ｏｆ 【１６】 Ｍｃｃｏｙ ＭＫ．ＭａｒＡｄｉｐｏｓｅ－Ｄｅｒｉｖｅｄ Ａｄｕｌｔ ＳｔｒｏｍａＩ（ＡＤＡＳ）ｃｅｌｌｓ ａｆｒｏｒｄ ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｍｏｄｅＩ ｏｆ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ‘ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｅｘｐ Ｎｅｕｒｏ１． 鼠的腹股沟脂肪垫分离培养脂肪组织间充质干细胞 并对这 种间充质干细胞的表面标志进行鉴定，得到了ＳＤ大鼠来源 的脂肪组织间充质干细胞的部分免疫表型．对继续进行脂肪 组织间充质干细胞的动物实验研究具有积极意义，并有利于 进一步阐释其干细胞性质 ２００８；２１０（１）：１４—２９． 【１７】 Ｇｒｅｃｏ ＳＪ．Ｒａｍｅｓｈｗａｒ Ｐ Ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＩＬ－１ ａｌｐｈａ ｏｎ ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ｆｒＯｍ ａｄｕｌｔ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ： ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｉｎ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏ１ ２００７；１ ７９ｆ５）：３３４２－３３５０． ｉｎｅｚ ＴＮ，Ｒｕｈｎ ＫＡ，ｅｔ ａ１．Ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｓ 【１８】 Ｍｃｃｏｙ ＭＫ，Ｍａｒｔｏｆ Ａｄｉｐｏｓｅ．Ｄｅｒｉｖｅｄ Ａｄｕｌｔ ＳｔｒｏｍａＩ（ＡＤＡＳ）ｃｅｌｌｓ ａｆｆｏｒｄ ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｍｏｄｅＩ ｏｆ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ ｓ ｄｉｓｅａｓｅ． 荣题详 芎 金 崔”：目前国内外对来自不同种属 Ｅｘｐ Ｎｅｕｒｏ１．２００８；２１０（１）：１４－２９． ＴＨ．Ｙｏｏｎ ＪＧ ＩｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａＩ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ 【１９】 Ｌｅｅ ｔｉｓｓｕｅ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ａｆｔｅｒ ｍｉｄｄｌｅ ｃｅｒｅｂｒａＩ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ ｉｎ ｒａｔｓ． 的脂肪组织问充质干细胞进行了表面标志鍪定，既有共识也 有分歧 虽然发现脂肪组织间充质干细胞部分囊 标志有别 于其他成体千细胞，但相关报道并不完全一致，结果并未在 国际会议上得到公认，缺乏鉴定的“金标准” 兹不层：实验鉴定了部分脂肪组织问充质干细胞的 Ｊ Ｃ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００８；１５（８）：９０７－９１２． ｐａｄｙ ＳＳ．Ｕｕｌｌ Ｒ，Ｏｇｌｅ ＲＣ，ｅｔ ａ１．Ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ：ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ 【２Ｏ】 Ｔｈｏｌａｎｄ ｂｅｙｏｎｄ Ｃｌｉｎ Ｐｌａｓｔ Ｓｕｒｇ．２００６；３３（１ １：５５－６２． ｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ 【２１】 Ｏｇａｗａ Ｒ．Ｔｈｅ ｉｖａｓｃｕｌａｄｚｅｄ ｔｉｓｓｕｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｆｉｅｌｄ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．ＣｕｒｒＳｔｅｍ ＣｅｌＩ ＲｅｓＴｈｅｒ ２００６；１（１１：１３－２０． Ｌｏｃｋｅ Ｍ．Ｗｉｎｄｓｏｒ Ｊ，Ｄｕｎｂａｒ ＰＲ．Ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ：；ｓｏｌａｔｉｏｎ．ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｐＩｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｓｕｒｇｅｒｙ．ＡＮＺ Ｊ 免疫表型，还有部分国外学者已经认可的表型特征未进行鉴 定，如ＣＤ７３和ＣＤ１０５等，仍须进行类似的后续研究。宜 进一步进行多向分化的诱导研究，更有利于阐释其干细胞特 性。 Ｓｕｒｇ．２００９；７９（４）：２３５—２４４． ｔｃｈｅｌＩ ＪＢ．Ｍｃｉｎｔｏｓｈ Ｋ，Ｚｖｏｎｉｃ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｅ Ｏｆ ［２３】 Ｍｉｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｃｅｌｌｓ：ｔｅｍｐｏｒａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｓｔｒｏｍａｌ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａｎｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｒｋｅｒｓ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ．２００６；２４（２１：３７６—３８５． ｍ Ｕ，Ｓｈｉｎ ＤＧ，Ｐａｒｋ ＪＳ，ｅｔ ａＩ．Ｈｏｍｉｎｇ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｅｍ 【２４】 Ｋｉｃｅｌｌｓ ｔｏ ｒａｄｉｏｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｃａｔｈｅｔｅｒ ａｂｌａｔｄ ｃａｎｉｅｎｅ ａｔｒｉｕｍ ａｎｄ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎｔｏ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅ—ｌｉｋｅ ｃｅｌｌｓ．１ｎｔ Ｊ Ｃａｒｄｉｏ１．２００９． Ｓａｆｆｏｒｄ ＫＭ．Ｈｉｃｏｋ ＫＣ，Ｓａｆｒｏｒｄ ＳＤ，ｅｆ ａ１．Ｎｅｕｒｏｇｅｎｉｃ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｒｉｎｅ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ． 提 猫ｌ屎错 ７ 五 实验为进一步进行脂肪组织间充 质干细胞的移植实验奠定了基础，是进行间充质干细胞临床 实验的必要前提之一。 【２５】 Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃ０ｍｍｕｎ．２００２；２９４（２）：３７１—３７９． ［２６】 Ｌｅｉ Ｌ，Ｌｉａｏ ｗＭ，Ｃｈｅｎｇ Ｐ ｅ１ ａｊ ｚｈ０ｎｇｇｕｏＫｅ×ｕｅ（Ｃｊｉ：Ｓｈｅｎｇｍｉｎｇ Ｋｅｘｕｅ）．２００７（０２）． 霄磊，廖威明．盛璞义，等．人类脂肪来源成体干细胞体外培养的生 物学特征研究及供体年龄对其增殖的影响［Ｊ】．中国利学（Ｃ辑：生命 科学）．２００７（０２）． ４２１０ Ｐ．ｏ．Ｂｏｘ １２Ｏ０．ｓｈｅｎｙａｎｇ １１Ｏ０Ｏ４ ｃｎ．ｚｇｌｃｌ（ｆ．ｃｏｍ
