松弛素在脂多糖致大鼠急性肺损伤中的作用

３２４１

􀅰论著􀅰

松弛素在脂多糖致大鼠急性肺损伤中的作用

毕小菁　王文军　代丽　罗丹　

陈梦晴

　　【摘要】　目的　观察松弛素对脂多糖所致大鼠急性肺损伤的影响ꎬ探讨其可能的作用机制ꎮ方法　３０只大鼠按随机数字表法分为对照组(ＮＳ组ꎬｎ＝１０)、模型组(ＬＰＳ组ꎬｎ＝１０)和松弛素组(ＲＬＸ组ꎬｎ＝１０)ꎮＮＳ组腹腔注射０.９％氯化钠溶液５ｍｇ/ｋｇꎬＬＰＳ组、ＲＬＸ组腹腔注射同等剂量的脂多糖复制肺损伤模型ꎮ１ｈ后ＮＳ组和ＬＰＳ组皮下注射０.９％氯化钠溶液２μｇ/ｋｇꎬＲＬＸ组皮下注射同等剂量的重组人松弛素￣２ꎮ２４ｈ后测定大鼠的动脉血气ꎬ肺功能ꎬ支气管肺泡灌洗液总细胞计数、中性粒细胞计数及蛋白含量ꎬ湿重/干重比值ꎻＨＥ染色观察病理学改变ꎻ免疫组化法观察ＴＧＦ￣β１的表达ꎮ结果　与ＮＳ组比较ꎬＬＰＳ组及ＲＬＸ组ＰａＣＯ２、ＰａＯ２、肺顺应性降低(Ｐ<０.０５)ꎬ吸气阻力、呼气阻力、中性粒细胞计数、蛋白含量、湿重/干重比值、ＴＧＦ￣β１蛋白表达明显增加(Ｐ<０.０５)ꎻ与ＬＰＳ组比较ꎬＲＬＸ组ＰａＣＯ２、ＰａＯ２、肺顺应性升高(Ｐ<０.０５)ꎬ吸气阻力、呼气阻力、中性粒细胞计数、蛋白含量、湿重/干重比值、ＴＧＦ￣β１蛋白表达显著降低(Ｐ<０.０５)ꎮ结论　松弛素可减轻脂多糖所致大鼠急性肺损伤ꎬ其机制可能是通过抑制ＴＧＦ￣β１表达实现ꎮ

【关键词】　松弛素ꎻ脂多糖ꎻ急性肺损伤ꎻ转化生长因子￣β１

【中图分类号】　Ｒ５６３.９　　【文献标识码】　Ａ　　【文章编号】　１００２－７３８６(２０１９)２１－３２４１－０４Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒｅｌａｘｉｎｏｎｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｉｎｒａｔｓ　ＢＩＸｉａｏｊｉｎｇꎬＷＡＮＧＷｅｎｊｕｎꎬＤＡＩＬｉꎬｅｔａｌ.ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｉｃｈｕａｎꎬＬｕｚｈｏｕ６４６０００ꎬＣｈｉｎａ

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒｅｌａｘｉｎｏｎｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｉｎｒａｔｓꎬａｎｄｔｏｅｘｐｌｏｒｅｉｔｓｐｏｓｓｉｂｌｅａｃｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍ.Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｉｒｔｙｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓ:ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ(ｎ＝１０)ꎬｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ(ｎ＝１０)ａｎｄｒｅｌａｘｉｎｇｒｏｕｐ(ｎ＝１０).Ｔｈｅｒａｔｓｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｉｎｊｅｃｔｅｄ５ｍｇ/ｋｇｏｆ０.９％ｓｏｄｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｔｈｏｓｅｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐａｎｄｒｅｌａｘｉｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｉｎｊｅｃｔｅｄ５ｍｇ/ｋｇｏｆｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｔｏｒｅｐｒｏｄｕｃｅａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｍｏｄｅｌｓ.Ａｔ１ｈａｆｔｅｒｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎꎬｔｈｅｒａｔｓｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｉｎｊｅｃｔｅｄｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ２μｇ/ｋｇｏｆｓｏｄｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｔｈｏｓｅｉｎｒｅｌａｘｉｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｉｎｊｅｃｔｅｄｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙｔｈｅｓａｍｅｄｏｓｅｓｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｒｅｌａｘｉｎ２.Ａｔ２４ｈａｆｔｅｒｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎꎬａｒｔｅｒｉａｌｂｌｏｏｄｇａｓꎬｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｕｎｃｔｉｏｎꎬｔｏｔａｌｃｅｌｌｃｏｕｎｔｓｏｆｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒｌａｖａｇｅｆｌｕｉｄꎬｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｃｏｕｎｔｓꎬｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｗｅｔ/ｄｒｙｗｅｉｇｈｔｒａｔｉｏｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ.Ｍｏｒｅｏｖｅｒꎬｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎｅｏｓｉｎｓｔａｉｎｉｎｇｗａｓｕｓｅｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓ.ＩｎａｄｄｉｔｉｏｎꎬｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＴＧＦ￣β１.Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＡｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐꎬｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆＰａＣＯ２ꎬＰａＯ２ａｎｄｌｕｎｇｃｏｍｐｌｉａｎｃｅｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐａｎｄｒｅｌａｘｉｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄ(Ｐ<０.０５)ꎬｈｏｗｅｖｅｒｔｈｅｉｎｓｐｉｒａｔｏｒｙｒｅｓｉｓｔａｎｃｅꎬｅｘｐｉｒａｔｏｒｙｒｅｓｉｓｔａｎｃｅꎬｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｃｏｕｎｔｓꎬｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔꎬｗｅｔ/ｄｒｙｗｅｉｇｈｔｒａｔｉｏａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＴＧＦ￣β１ｏｆｔｈｅｒａｔｓｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｔｈｅｌａｔｔｅｒｔｗｏｇｒｏｕｐｓ(Ｐ<０.０５).ＭｏｒｅｏｖｅｒꎬａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐꎬｔｈｅＰａＣＯ２ꎬＰａＯ２ａｎｄｌｕｎｇｃｏｍｐｌｉａｎｃｅｏｆｔｈｅｒａｔｓｉｎｒｅｌａｘｉｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｅｄꎬｗｈｉｌｅｔｈｅｉｎｓｐｉｒａｔｏｒｙｒｅｓｉｓｔａｎｃｅꎬｅｘｐｉｒａｔｏｒｙｒｅｓｉｓｔａｎｃｅꎬｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｃｏｕｎｔｓꎬｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔꎬｗｅｔ/ｄｒｙｗｅｉｇｈｔｒａｔｉｏａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＴＧＦ￣β１ｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ(Ｐ<０.０５).Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｒｅｌａｘｉｎｃａｎａｌｌｅｖｉａｔｅｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｉｎｒａｔｓꎬａｎｄｉｔｓａｃｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｍａｙｂｅｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＴＧＦ￣β１.

【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】　ｒｅｌａｘｉｎꎻｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅꎻａｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙꎻｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｂｅｔａ１

　　急性肺损伤(ａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙꎬＡＬＩ)继发于各种直接或间接的损伤ꎬ常导致急性低氧性呼吸衰竭ꎬ大多数患者在临床上有急性呼吸窘迫综合征(ａｃｕｔｅｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｔｒｅｓｓｓｙｎｄｒｏｍｅꎬＡＲＤＳ)[１]ꎮＡＬＩ/ＡＲＤＳ在病理学上表现为弥漫性肺泡损伤、严重细胞浸润、肺

作者单位:６４６０００　四川省泸州市ꎬ西南医科大学附属医院呼吸内科

通讯作者:王文军ꎬ６４６０００　四川省泸州市ꎬ西南医科大学附属医院呼吸内科ꎻ

Ｅ￣ｍａｉ:１７１６３９２２８２＠ｑｑ.ｃｏｍ

泡￣毛细血管通透性增加[２]ꎮＡＬＩ/ＡＲＤＳ死亡率高ꎬ有研究表明１９８４年至２００６年１１月ＡＬＩ/ＡＲＤＳ死亡率为４４.３％[３]ꎮ松弛素是一种肽类激素ꎬ其作用在妊娠和分娩过程中十分重要[４]ꎮ同时也参与了高血压和心力衰竭的病理生理过程ꎬ血管生成和骨重建ꎬ以及癌症和纤维化的分子途径[５ꎬ６]ꎮ近年来ꎬ有研究表明ꎬ松弛素抗纤维化性质在抗腕管综合征、肾脏纤维化、肝脏纤维化、心肌纤维化、气道重构等方面都具有一定保护作用[７－１１]ꎮ但目前笔者尚未发现松弛素是否对ＡＬＩ具有保护作用的相关报道ꎮ因而ꎬ本研究通过探讨松

３２４２河北医药２０１９年１１月第４１卷第２１期　ＨｅｂｅｉＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌꎬ２０１９ꎬＶｏｌ４１ＮｏｖＮｏ􀆰２１

弛素在ＡＬＩ中的作用及其机制ꎬ旨在为ＡＬＩ患者的临１　材料与方法

床治疗策略和预后提供理论依据和实验依据ꎮ

Ｄ)测定:处死大鼠ꎬ暴露胸腔ꎬ结扎气管ꎬ将肺组织与其他组织游离ꎬ取下肺组织ꎬ冰０.９％氯化钠溶液冲洗血管ꎬ用无菌吸水纸吸干水分ꎬ取左肺下叶称湿重ꎬ然后置烤箱(８０℃ꎬ２０ｈ)烤至恒重后称干重ꎬ计算得出１.３.６　病理学观察:取右肺中叶浸泡于４％多聚甲醛２４ｈ后用石蜡包埋ꎬ石蜡块连续切片ꎬ厚度５μｍꎬ然后ＨＥ)染色ꎮ每只大鼠制作３张切片ꎬ光学显微镜下观[１２ꎬ１３]用二甲苯脱蜡ꎬ再由从高浓度到低浓度乙醇进行水合ꎬ最后入蒸馏水进行苏木精￣伊红(ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ￣ｅｏｓｉｎꎬＷ/Ｄ比值ꎮ

１.１　实验动物及主要试剂　健康ＳＰＦ级雄性ＳＤ大鼠[合格证号:ＳＹＸＫ(川)２０１７￣０６５]ꎬ周龄７~８周ꎬ体重１８０~２００ｇꎬ购买于成都达硕实验动物有限公司ꎮ蛋白检测试剂盒ꎬ购于南京建成生物科技有限公司ꎮ２５μｇ/支ꎬ购于Ｐｅｐｒｏｔｈｃｈ公司ꎮ脂多糖(Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃ￣重组人松弛素￣２(ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｒｅｌａｘｉｎ￣２)ꎬ规格ｈａｒｉｄｅꎬＬＰＳ)ꎬ规格１０ｍｇ/支ꎬ购于Ｓｉｇｍａ公司ꎮ转化

β１)生长抗体因子ꎬ规格β１(２００Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇμｇ/ｍｌꎬ购于ｇｒｏｗｔｈＳａｎｔａｆａｃｔｏｒ公司ꎮ

ｂｅｔａ１ꎬＴＧＦ￣１.数字表法分为２　动物分组及模型制作(ＬＰＳ３组ꎬ对照组　(将ＮＳ３０组只ＳＤ大鼠按随机大鼠给予一次性腹腔注射组ꎬｎ＝１０)、松弛素组０.(９％ＲＬＸ氯化钠溶液组ꎬꎬｎｎ＝＝１０)、１０)ꎮ模型组(５ｍｇＮＳ/ｋｇ)组处(５理ꎬ其余２组大鼠给予０.９％ｍｇ氯化钠溶液/ｋｇ)处理ꎮ(２１ｈμｇ后/ＮＳｋｇ)ꎬ组及一次松弛素组皮下注射稀释ＬＰＳ性组大鼠皮下注射腹腔注射ＬＰＳ后的重组人松弛素￣２(２μｇ/ｋｇ)ꎮ２４ｈ后进行相应指标测定１.ꎮ

１.３　３.１　观察指标及测定方法血ꎬ立即行血气分析动脉血气分析ꎮ

:于腹主动脉抽取０.５ｍｌ动脉１.阻力３.２　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅꎬＲｅ)、(ｉｎｓｐｉｒａｔｏｒｙ肺功能测定大鼠(戊巴比妥钠肺顺应性ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅꎬ:用动物肺功能仪测定大鼠的吸气４０ｍｇ/(ｌｕｎｇＲｉ)、ｋｇꎬ腹腔注射ｃｏｍｐｌｉａｎｃｅꎬＬＣ)ꎮ呼气阻力(ｅｘｐｉｒａｔｏｒｙ)ꎬ仰卧固定麻醉ꎬ行气管插管ꎬ然后放入封闭的体描箱ꎬ连接动物呼吸机ꎬ１.测定大鼠吸气阻力ｆｌｕｉｄꎬＢＡＬＦ)３.３　支气细胞计数管肺、呼气阻力及肺顺应性泡:灌通过气管插管向肺内注射洗液(ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒꎮ

ｌａｖａｇｅ０.９％氯化钠溶液ꎬ可见膨起ꎬ按摩双肺ꎬ然后缓慢回５ｍｌ

抽ꎬ反复３次ꎬ回收ＢＡＬＦꎬ回收率>８０％为合格标本ꎮ

将ＢＡＬＦ以２５０×ｇ离心５ｍｉｎꎬ将沉淀物用０.５ｍｌ磷酸缓冲溶液悬浮ꎬ取１０μｌ悬浮液于载玻片上ꎬ用甲醇固定１５ｍｉｎꎬ晾干ꎬ行Ｇｉｅｍｓａ染色溶液染色ꎮ显微镜１.下观察细胞行总细胞计数和中性粒细胞计数(ｂｉｃｉｎｃｈｏｎｉｎｉｃ３.４　

ＢＡＬＦ离心后取上清液ａｃｉｄꎬＢＣＡ)蛋白测ꎬ加入蛋白检测试剂盒中按说明书进蛋白测定法定:采用ꎮ二将所得喹ꎮ

啉甲ＢＡＬＦ酸

(ｍｇ行检/ｍｌ)ꎮ

测ꎬ根据标准曲线计算标本中蛋白质含量１.３.５　肺组织湿重(ｗｅｔｗｅｉｇｈｔꎬＷ)/干重(ｄｒｙｗｅｉｇｈｔꎬ

察病理学改变ꎬ并进行肺损伤评分包含以下４项指标:①肺泡充血ꎻ②出血ꎮꎻ③肺损伤评分肺泡腔或血管壁中性粒细胞浸润或聚集ꎻ④肺泡壁增厚和(或)透明膜形成ꎮ４项指标分别按肺组织破坏程度评分:无损害评为０分ꎻ轻度损害评为１分ꎻ中度损害评为２分ꎻ严重损害评为３分ꎮ每张切片各项指标评分总和为该切片急性肺损伤评分ꎬ每组大鼠所有切片评分的１.平均数即为该组大鼠肺损伤分数ꎮ

大鼠右肺中叶组织切片３.７　免疫组化检测ＴＧＦ￣β１ꎬ然后用二甲苯脱蜡表达[１４]:将石蜡包埋的ꎬ再由从高浓度到低浓度乙醇进行水合ꎮ将切片加入０.１ｍｏｌ/Ｌ柠檬酸钠缓冲液中ꎬ煮沸１０ｍｉｎ进行抗原修复ꎻ用组化笔画圈后将切片滴入３％过氧化氢ꎬ室温下孵育ꎻ加入山羊ＴＧＦ￣β１血清封闭液进行封闭ꎬ盒ꎬ室温下复温后每张片子加入抗体ꎬ放在４℃冰箱中过夜室温５０ꎻ下孵育ꎻ滴加抗μｌ第链霉菌抗生物２天ꎬ取出湿素蛋白￣过氧化物酶溶液ꎬ再滴加１００μｌ二氨基联苯胺溶液染色ꎬ再用苏木素复染使细胞核变为蓝色ꎬ最后用由低浓度到高浓度乙醇脱水ꎮ切片凉干后封片ꎬ盖上盖玻片ꎬ晾干后放在显微镜下观察ꎮ若蛋白表达为阳性ꎬ则在显微镜下可见细胞内出现棕黄色颗粒ꎬ颜色越深ꎬ说明其表达越强ꎮ应用Ｌｅｉｅａ系统对显微镜下图像进行采集ꎮ应用Ｉｍａｇｅ￣ＰｒｏＰｌｕｓ(６.０)图文分析软件对采集的图像进行分析ꎮ每只大鼠制作３张切片ꎬ每张切片随机取５个视野(×２００)ꎬ测量每个区域棕黄色颗ＩＯＤ)ꎬ粒的累计积分光密度(Ｉｎｔｅｇｒａｌｏｐｔｉｃａｌｄｅｎｓｉｔｙꎬ组大鼠平均光密度值每组大鼠所有切片积分光密度的平均值即为该(ｍｅａｎｏｆＩＯＤ)ꎬ作为ＴＧＦ￣β１蛋１.白表达量ꎮ

料以４　ｘ􀭰统计学分析±ｓ表示ꎬ３　组间比较采用单因素方差分析应用ＳＰＳＳ１７.０统计软件ꎬ计量资ꎬ事后检验采用２　２.１　结果ＬＳＤ法ꎬＰ<０.０５为差异有统计学意义ꎮ３组Ｗ/Ｄ、Ｒｉ、Ｒｅ、ＣＬ比较　与ＮＳ组比较ꎬＬＰＳ

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组、ＲＬＸ组肺组织湿重/干重比值升高(Ｐ<０.０５)ꎬ而ＲＬＸ组Ｒｉ、Ｒｅ均较ＮＳ组明显升高(Ｐ<０.０５)ꎬＬＣ显

组别ＮＳ组

４.５５±０.１０Ｗ/Ｄ

１.８２±０.０１

ＲＬＸ组与ＬＰＳ组比较ꎬ比值降低(Ｐ<０.０５)ꎮＬＰＳ组、

Ｒｉ(ｃｍＨ２Ｏ􀅰ｍｌ􀅰ｓ－１)

３.３７±０.１６∗２.４５±０.１６∗＃

著降低(Ｐ<０.０５)ꎻ但经重组人松弛素￣２干预后ꎬ其Ｒｉ、Ｒｅ均降低(Ｐ<０.０５)ꎬＬＣ升高(Ｐ<０.０５)ꎮ见表１ꎮ

ｎ＝１０ꎬｘ􀭰±ｓ

１.８２±０.０２

ＬＣ(ｍｌ/ｃｍＨ２Ｏ)０.１８８±０.０３２０.１０１±０.０１６∗０.１２３±０.０１２∗＃

Ｒｅ(ｃｍＨ２Ｏ􀅰ｍｌ－１􀅰ｓ－１)

３.３５±０.１１∗２.３０±０.０７∗＃

表１　３组Ｗ/Ｄ、Ｒｉ、Ｒｅ、ＣＬ比较

ＬＰＳ组

２.２　３组动脉血气分析比较　ＬＰＳ组与ＮＳ组比较ꎬｐＨ值、ＰａＣＯ２、ＰａＯ２值均降低(Ｐ<０.０５)ꎻＲＬＸ组与ＮＳ组比较ＰａＣＯ２、ＰａＯ２值均降低(Ｐ<０.０５)ꎬｐＨ值比　　注:与ＮＳ组比较ꎬ∗Ｐ<０.０５ꎻ与ＬＰＳ组比较ꎬ＃Ｐ<０.０５

ＲＬＸ组

５.１４±０.０９∗

４.７９±０.１５∗＃

２.５　３组ＴＧＦ￣β１表达情况和平均光密度值比较　

ＮＳ组可见肺泡上皮细胞有少量ＴＧＦ￣β１表达ꎬＬＰＳ组肺泡上皮细胞、巨噬细胞、炎细胞、内皮细胞内均有较差异无统计学意义(Ｐ＝０.４２９)ꎬＲＬＸ组与ＬＰＳ组比较ꎬＲＬＸ组ＰＨ值、ＰａＣＯ２和ＰａＯ２均升高(Ｐ<０.０５)ꎮ见表２ꎮ

表２　３组动脉血气分析比较

ｎ＝１０ꎬｘ􀭰±ｓ组别

ＮＳ组

７.３８ｐＨ±值

０.２２ＰａＣＯ４８.２(ｍｍＨｇ)ＰａＯＬＰＳ组

４２.６３±０.５６９８.２(ｍｍＨｇ)　　ＲＬＸ注:组

７.与ＮＳ组比较７.３１３７±ꎬ∗±０.Ｐ０.２０<２２∗

∗＃

０.０５ꎻ与ＬＰＳ４４.１４组比较７８±±０.０.６４ꎬ７７∗∗＃

７２.７１＃Ｐ<０.０５

８８.８４±０.６５３４±±１.１.２０２９∗∗＃

２.较３　　与３ＮＳ组总细胞计数组相比ꎬＬＰＳ、中性粒细胞计数组、ＲＬＸ组支气管肺泡灌洗液、蛋白含量比中总细胞计数(著降低Ｐ<０.、中性粒细胞计数及蛋白量均明显升高(０５)ꎻＰ<０.而与０５)ꎮＬＰＳ见表组比较３ꎮ

ꎬＲＬＸ组上述各指标均显表３　３组总细胞计数、中性粒细胞计数、蛋白含量比较

ｎ＝１０ꎬｘ􀭰±ｓ

组别总细胞计数

蛋白含量计数(×１０ＮＳ１.(８７×１０±０.６)

中性粒细胞ＬＰＳ组组

０６４.８２±０.８０

４)４.(ｍｇ２３/ｍｌ)

±１.８５∗＃

２７.１８.５９２６±±０.０.８３８５∗∗＃

９０±±０.０５２.　ＲＬＸ　注组

１０.:与ＮＳ组比较６.９５９０

±０.６６∗ꎬ∗Ｐ<０.０５ꎻ与ＬＰＳ组比较ꎬ＃Ｐ<０.０５

４.４.６８

±０.０.０９０７∗

∗＃

ＨＥ４　３组ＨＥ染色情况和肺损伤评分比较　清晰染色后可见ꎬ肺泡内无炎性细胞浸润ꎬＮＳ组大鼠肺组织肺泡壁正常肺组织经ꎻＬＰＳ组大鼠肺组织肺泡ꎬ肺泡腔结构严重破坏ꎬ肺泡腔内可见出血、渗液ꎬ部分肺泡壁塌陷ꎬ大量炎症细胞浸润ꎻ经重组人松弛素￣２干预后上述情况均明显减轻(７.伤评分较５０±０.５３)分、ＲＬＸꎮＮＳ组组(０.６０±０.５２)分、ＬＰＳ组ＬＰＳ组降低ＮＳ(Ｐ组明显升高(４.<０.０５)ꎮ见图(Ｐ５０<１ꎮ

０.±０５)ꎬＲＬＸ０.５３)ꎻＬＰＳ组评分较组肺损图Ａ:ＮＳ１　３组组ꎻＢ:ＬＰＳＨＥ染色组(ＨＥꎻＣ:ＲＬＸ×２００)

组

ＴＧＦ￣β１ＴＧＦ￣β１阳性表达ꎬ且较ＮＳ组明显增强ꎬ组０.ＴＧＦ￣β１表达较的平ＬＰＳ均光组显著减弱密度值明ꎮ显定量分析显示而ＲＬＸ高于ＮＳ组(ꎬＬＰＳ组Ｐ<

４ꎬ０５)ꎬ图２ꎮ

而ＲＬＸ组明显低于ＬＰＳ组(Ｐ<０.０５)ꎮ见表表４　３组平均光密度值比较

ｎ＝１０ꎬＭｅａｎｏｆＩＯＤꎬｘ􀭰±ｓ

ＮＳ组别

组３.３７ＴＧＦ￣β１

±０.４４　　注:与ＲＬＸＬＰＳ组ＮＳ组比较组

１５.ꎬ∗Ｐ<０.０５ꎻ与ＬＰＳ组比较１０.９０ꎬ＃Ｐ２３±<±１.０.７２∗

０.０５

４１∗＃

图２　３组Ａ:ＮＳＴＧＦ￣β１组ꎻＢ:ＬＰＳ表达情况组ꎻＣ:ＲＬＸ(免疫组化组

×２００)

３　　管疾病　讨论

造成、药物不良反应ＡＬＩ/ＡＲＤＳ的原因有很多、休克、急性嗜酸性粒细胞肺炎ꎬ比如感染、胶原血、

免疫介导的肺出血和血管炎、放射性肺炎等[１５]革兰阴性杆菌感染是引起ＡＬＩ的常见因素ꎮ细胞壁的ꎮ其中脂多糖是革兰阴性杆菌内毒素的主要成分ꎬ也是最主要的致病因素[１６]细胞因子的产生以及随后在肺组织中炎症细胞的隔离ꎮ脂多糖可能通过增加炎性和趋化而导致ＡＬＩ[１７]后ꎬＬＰＳ组与ＮＳꎮ本实验中组比较ꎬ肺组织ꎬ大鼠腹腔注射Ｗ/Ｄ比值ＬＰＳ、ＢＡＬＦ后２４中

ｈ性粒细胞计数和蛋白质含量均明显升高ꎬ说明经ＬＰＳ处理后肺通透性和肺水肿增加ꎻＨＥ染色后在光学显微镜下观察ꎬＬＰＳ组大鼠肺组织肺泡结构严重破坏ꎬ肺泡腔内可见出血、渗液ꎬ部分肺泡壁塌陷ꎬ大量炎症细胞浸润ꎬ提示本实验成功建立了ＬＰＳ所致急性肺损伤模型　　ꎮ

当机体受到炎症或损伤因素ꎬ如内毒素ꎬ刺激后

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ａｎｄＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓꎬ２００６ꎬ１１２:３８￣５６.

７　ＫａｎｇＹＭꎬＬｅｅＨＭꎬＭｏｏｎＳＨꎬｅｔａｌ.Ｒｅｌａｘｉｎｍｏｄｕｌａｔｅｓｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ

ＭＭＰｓａｎｄＴＩＭＰｓｉｎｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃａｒｐａｌｔｕｎｎｅｌｓｙｎｄｒｏｍｅ.ＹｏｎｓｅｉＭｅｄＪꎬ２０１７ꎬ５８:４１５￣４２２.

８　ＨｕｕｓｋｅｓＢＭꎬＷｉｓｅＡＦꎬＣｏｘＡＪꎬｅｔａｌ.Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｔｈｅｒａｐｙｏｆ

ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｓｅｒｅｌａｘｉｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙａｔｔｅｎｕａｔｅｓｒｅｎａｌｆｉｂｒｏｓｉｓｉｎｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ.ＴｈｅＦＡＳＥＢＪｏｕｒｎａｌꎬ２０１５ꎬ２９:５４０￣５５３.

９　ＫｏｂａｌａｖａＺꎬＶｉｌｌｅｖａｌｄｅＳꎬＫｏｔｏｖｓｋａｙａＹꎬｅｔａｌ.Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆ

ｓｅｒｅｌａｘｉｎｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｈｅｐａｔｉｃｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ:ａｓｉｎｇｌｅ￣ｄｏｓｅꎬｏｐｅｎ￣ｌａｂｅｌꎬｐａｒａｌｌｅｌｇｒｏｕｐｓｔｕｄｙ.ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙꎬ２０１５ꎬ７９:９３７.

１０　ＣａｉＪＪꎬＣｈｅｎＸꎬＣｈｅｎＸＸꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉ￣Ｆｉｂｒｏｓｉｓｅｆｆｅｃｔｏｆｒｅｌａｘｉｎａｎｄ

ｓｐｉｒｏｎｏｌａｃｔｏｎｅｃｏｍｂｉｎｅｄｏｎｉｓｏｐｒｅｎａｌｉｎｅ￣Ｉｎｄｕｃｅｄｍｙｏｃａｒｄｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓｉｎｒａｔｓｖｉａｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ￣ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ.ＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌＴＧＦ￣β１可被激活[１８]ꎮ本研究结果显示ꎬ大鼠经过腹腔注射脂多糖２４ｈ后ꎬ肺泡上皮细胞、巨噬细胞、炎细胞、内皮细胞内均有ＴＧＦ￣β１阳性表达ꎬ且定量分析结果提示ＴＧＦ￣β１表达明显高于０.９％氯化钠溶液对照组ꎮ既往有研究表明ꎬ在ＡＬＩ/ＡＲＤＳ早期ＴＧＦ￣β１即４８ｈ内即增加[２０]ꎮＴＧＦ￣β１具有多种生物学效应ꎬ对多种炎性细胞有趋化作用ꎬ还能刺激多种炎性因子释放、调节炎性反应ꎮＰｉｔｔｅｔ等[２１]的研究结果显示ꎬＡＬＩ小鼠早期即发现ＴＧＦ￣β１高表达ꎬ并增加内皮细胞通被激活[１９]ꎮ也有研究报道ꎬＴＧＦ￣β基因在肺损伤后

透性ꎬ导致肺水肿形成ꎮ本实验中ＬＰＳ组ＴＧＦ￣β１表达较ＮＳ组明显增强ꎬ与既往研究[１９－２１]　等　[２２]松弛素是一种肽类激素实验表明ꎬ松弛素能通过其抗炎特性降低心肌梗ꎬ具有抗炎作用相符合ꎮꎮＢｅｉｅｒｔ死后小鼠心房颤动的易感性ꎬ小剂量的松弛素治疗也可缓解心脏炎性[２３]烟烟雾的动物的实验中可见ꎮ另外ꎬ在用松弛素治疗暴露于香ꎬ通过显着减少促炎性细Ｂｅｚｈａｅｖａ胞因子的等释放ꎬ从而减少白细胞的炎症募集[２４][２５]实验表明松弛素受体缺乏能促进血管ꎮ

炎症ꎮ本实验研究结果显示ꎬ经重组人松弛素￣２处理后ꎬ大鼠肺组织Ｗ/Ｄ比值、ＢＡＬＦ中性粒细胞计数和蛋白质含量均较ＬＰＳ组明显降低ꎬ肺泡结果的破坏及炎性细胞的浸润均减轻ꎬ表明松弛素具有缓解ＬＰＳ诱导的急性肺损伤的能力ꎮ免疫组化结果提示ＲＬＸ组肺组织ＴＧＦ￣β１表达较ＬＰＳ组明显降低ꎬ提示松弛素的抗炎作用可能是通过抑制　的表达　综上所述ꎬ从而在一定程度上起到缓解急性肺损伤的作ꎬ重组人松弛素ＴＧＦ￣β１￣２可能通过抑制的表达实现的ＴＧＦ￣β１ꎮ用ꎮ这可能是松弛素治疗肺损伤的机制之一ꎮ但本实验为动物实验ꎬ仅为松弛素治疗急性肺损伤提供实验理论及临床治疗思路ꎬ用于治疗人类ＡＬＩ还需要更多的实验及临床研究ꎮ

１　ＢｅａｓｌｅｙＭＢ.Ｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｓｔ’ｓ参考文献

２　ＬａｂａｐｐｒｏａｃｈｔｏａｃｕｔｅｌｕｎｇＩｎｊｕｒｙ.ＡｒｃｈＰａｔｈｏｌ

ＦｅｉｎＭｅｄꎬ２０１０ꎬ１３４:７１９￣７２７.

ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｔｒｅｓｓＡＭꎬＣａｌａｌａｎｇ￣ＣｏｌｕｃｃｉｓｙｎｄｒｏｍｅｉｎｓｅｐｓｉｓＭＧ.Ａｃｕｔｅａｎｄｓｅｐｔｉｃｌｕｎｇｓｈｏｃｋ.ｉｎｊｕｒｙＣｒｉｔａｎｄＣａｒｅａｃｕｔｅ

３　２０００ꎬ１６:２８９￣３１７.

ＣｌｉｎꎬＰｈｕａｄｉｓｔｒｅｓｓＪꎬＢａｄｉａｓｙｎｄｒｏｍｅＪＲꎬＡｄｈｉｋａｒｉｄｅｃｒｅａｓｅｄＮＫꎬｅｔｏｖｅｒｔｉｍｅ:ａａｌ.Ｈａｓｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｍｏｒｔａｌｉｔｙｆｒｏｍｒｅｖｉｅｗ.ａｃｕｔｅＡｍｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ

ＪＲｅｓｐｉｒ４　ＣｒｉｔＨｏｓｓａｉｎＣａｒｅＭＡꎬＭｅｄꎬ２００９ꎬ１７９:７２２０￣７２２７.

ＲｏｓｅｎｇｒｅｎＫＪꎬＳａｍｕｅｌＣＳꎬｅｔａｌ.５　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅＣｅｒｎａｒｏａｓｐｅｃｔｓａｎｄＶꎬＬａｃｑｕａｎｉｔｉｏｆｈｕｍａｎｒｅｌａｘｉｎ￣２.ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＡꎬＬｕｐｉｃａＢｉｏｌＴｈｅｍｉｎｉｍａｌａｃｔｉｖｅ

ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓＲꎬｅｔＣｈｅｍꎬ２０１１ꎬ２８６:３７５５５￣３７５６５.

ａｌ.Ｒｅｌａｘｉｎ:ｎｅｗｆｏｒａｎｏｌｄｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ

６　ｒｅｓｅａｒｃｈＴｈｏｍａｓｉｔｓｅｍｅｒｇｉｎｇＤꎬＣｏｒｎｅｌｉａｒｅｖｉｅｗｓꎬ２０１４ꎬ３４:７７￣１０５.

ｐｒｏｔｅｉｎ.ＭｅｄｉｃｉｎａｌｒｏｌｅｆｏｒＢꎬＧｅｒｔｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＢꎬｅｔａｎｄａｌ.Ｒｅｌａｘｉｎ￣ａｃｌｉｎｉｃａｌｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ.ｐｌｅｉｏｔｒｏｐｉｃＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ

ｈｏｒｍｏｎｅａｎｄ

１１　Ｂｉｏｃｈｅｍꎬ２０１７ꎬ４１:１１６７￣１１７８.

ＡｌｅｓｓｒｏｉｎｄｕｃｅｄＰꎬｌｕｎｇＧｉｕｌｉａｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎＢꎬＬａｕｒａａｎｄＬꎬｄａｍａｇｅｅｔａｌ.ＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎｂｙＨ２Ｒｅｌａｘｉｎｆｒｏｍｃｉｇａｒｅｔｔｅ(Ｓｅｒｅｌａｘｉｎ).ｓｍｏｋｅ￣

１２　ＰｈａｒｍａｃｏｌＴｓａｉＳｃｕｔｅｌｌａｒｉａＣＬꎬＬｉｎＥｘｐＹＣꎬＴｈｅｒꎬ２０１６ꎬ３５７:４５１￣４５８.

ＪＷａｎｇＨＭꎬｅｔａｌ.Ｂａｉｃａｌｅｉｎꎬａｎａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｏｆ

１３　ｌｕｎｇＬｉｎｉｎｊｕｒｙｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓꎬｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄａｃｕｔｅｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄＹＣꎬＬａｉｉｎＹＳꎬＣｈｏｕｒａｔｓ.ＪｏｕｒｎａｌＴＣ.ｏｆＴｈｅＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙꎬ２０１４ꎬ１５３:１９７￣２０６.ａｃｕｔｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｅｆｆｅｃｔｉｓｏｆａｌｐｈａ￣ｌｉｐｏｉｃｍｅｄｉａｔｅｄｂｙＡｃｉｄｉｎ

１４　ｏｘｙｇｅｎａｓｅ￣１.ｉｎｄｕｃｅｄＳｈｅｎＨＴꎬｌｕｎｇＷｕＥｖｉｄＢａｓｅｄＣｏｍｐｌｅｍｅｎｔＡｌｔｅｒｎａｔＭｅｄꎬ２０１３ꎬ２０１３:１￣１２.ｈｅｍｅｉｎｊｕｒｙＮꎬＷａｎｇｉｎｍｉｃｅＹꎬｅｔａｌ.Ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅａｔｔｅｎｕａｔｅｓｐａｒａｑｕａｔ￣

１５　ａｎｄｂｙａｌｔｅｒｉｎｇｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎꎬｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ１６　ｍｏｌｅｃｕｌａｒＢｕｔｔｆｉｂｒｏｓｉｓ.ＹꎬＫｕｒｄｏｗｓｋａＩｎｔＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１７ꎬ４６:１６￣２２.

Ｍａｔｔｈｅｗｒｅｖｉｅｗ.ＡꎬＡｌｌｅｎＴＣ.Ａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ:Ａｃｌｉｎｉｃａｌａｎｄ

ｏｆｅｎｄｏｔｏｘｉｎＭꎬＬｉｔｏｌｅｒａｎｃｅＬ.ＡｒｃｈＭｏｌｅｃｕｌａｒＰａｔｈｏｌａｎｄｐｒｉｍｉｎｇ.ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓＬａｂＭｅｄꎬ２０１６ꎬ１４０:３４５￣３５０.

ＡｒｃｈａｎｄＩｍｍｕｎｏｌｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌＴｈｅｒｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ

１７　１３￣１８.

Ｅｘｐꎬ２００１ꎬ６０:ＴｏｇｂｅｔｕｍｏｕｒＤꎬＳｃｈｎｙｄｅｒ￣ＣａｎｄｒｉａｎｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒｄｅｐｅｎｄｅｎｔＳꎬＳｃｈｎｙｄｅｒｅｎｄｏｔｏｘｉｎ￣ｉｎｄｕｃｅｄＢꎬｅｔａｌ.Ｔｏｌｌ￣ｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｄ

１８　ＩｎｔＹｏｓｈｉｍｏｔｏＪＥｘｐＰａｔｈｏｌꎬ２００７ꎬ８８:３８７￣３９１.

ａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ.β１(ＴＧＦ￣β１ＮꎬＴｏｇｏ)ｉｎＳꎬＫｕｂｏｔａｅｎｄｏｔｏｘｉｎＴꎬｅｔａｌ.Ｒｏｌｅｏｆｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ￣

１９　ｈｅｐａｔｅｃｔｏｍｙｉｎｄｕｃｅｄｈｅｐａｔｉｃｆａｉｌｕｒｅａｆｔｅｒｅｘｔｅｎｓｉｖｅＷｅｓｓｅｌｋａｍｐｅｒｉｎｒａｔｓ.ＪＥｎｄｏｔｏｘｉｎＲｅｓꎬ２００５ꎬ１１:３３￣３９.

ｃｈａｎｇｅｓ２０　ｇｒｏｗｔｈＫａｍｉｎｓｋｉｆａｃｔｏｒｄｕｒｉｎｇＳＣꎬｂｅｔａ.ｔｈｅＣａｓｅＬＭꎬＨｅｎｎｉｎｇＬＮꎬｅｔａｌ.Ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ

ＡｍｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＪｏｆａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ:ｒｏｌｅｏｆｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎＮꎬｌｕｎｇｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｉｎＡｌｌａｒｄｐｕｌｍｏｎａｒｙＪＤꎬＲｅｓｐｉｒａｎｄｆｉｂｒｏｓｉｓ.ｆｉｂｒｏｓｉｓＰｉｔｔｅｔＣｒｉｔＪＦꎬＣａｒｅＰｒｏｃｒｅｖｅａｌｓｅｔａｌ.Ｍｅｄꎬ２００５ꎬ１７２:１３９９￣１４１１.ＮａｔｌｄｉｓｔｉｎｃｔＧｌｏｂａｌＡｃａｄＳｃｉｐｒｏｇｒａｍｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇｅｎｅ

ＵＳＡꎬ２０００ꎬｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ９７:２１　１７７８￣１７８３.

ＰｉｔｔｅｔＪＦꎬＧｒｉｆｆｉｔｈｓＭＪꎬＧｅｉｓｅｒＴꎬｅｔａｌ.ＴＧＦ￣βｉｓａｃｒｉｔｉｃａｌｍｅｄｉａｔｏｒ２２　ａｃｕｔｅＢｅｉｅｒｔｌｕｎｇｐｏｓｔ￣ｉｎｆａｒｃｔＴꎬＴｉｙｅｒｉｌｉｉｎｊｕｒｙ.ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｔｒｉａｌＶꎬＫｎａｐｐｅＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔꎬ２００１ꎬ１０７:１５３７￣１５４４.

ｏｆ

ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ.ｆｉｂｒｉｌｌａｔｉｏｎＶꎬｅｔＢｉｏｃｈｅｍｉｎｍｉｃｅａｌ.ＲｅｌａｘｉｎＢｉｏｐｈｙｓｄｕｅＲｅｓｔｏｒｅｄｕｃｅｓａｎｔｉ￣ｆｉｂｒｏｔｉｃｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｏ

Ｃｏｍｍｕｎꎬ２０１７ꎬａｎｄ４９０:ａｎｔｉ￣２３　６４３￣６４９.

ＢｅｉｅｒｔａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎＴꎬＫｎａｐｐｅＶꎬＴｉｙｅｒｉｌｉＶꎬｅｔａｌ.Ｃｈｒｏｎｉｃｌｏｗｅｒ￣ｄｏｓｅｒｅｌａｘｉｎ

ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｄｕｅｐｒｏｔｅｃｔｓｔｏａｎｔｉ￣ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｆｒｏｍａｒｒｈｙｔｈｍｉａａｎｄａｎｔｉ￣ｆｉｂｒｏｔｉｃｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ.ｍｙｏｃａｒｄｉａｌＩｎｔＪ２４　Ｃａｒｄｉｏｌꎬ２０１８ꎬ２５０:２１￣２８.

ＰｉｎｉｉｎｄｕｃｅｄＡꎬＢｏｃｃａｌｉｎｉｌｕｎｇｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎＧꎬＬｕｃａｒｉｎｉａｎｄＬꎬｅｔＤａｍａｇｅａｌ.ＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎｂｙＨ２ｒｅｌａｘｉｎｆｒｏｍｃｉｇａｒｅｔｔｅ(Ｓｅｒｅｌａｘｉｎｓｍｏｋｅ￣

２５　ＰｈａｒｍａｃｏｌＢｅｚｈａｅｖａｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙＴꎬＥｘｐｄｅＴｈｅｒꎬ２０１６ꎬ３５７:４５１￣４５８.

).ＪＶｒｉｅｓＭＲꎬＧｅｅｌｈｏｅｄｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｉｎｐｒｏｍｏｔｅｓａｒｔｅｒｉｏｖｅｎｏｕｓｖａｓｃｕｌａｒｆｉｓｔｕｌａｓ.ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎＷＪꎬｅｔＦＡＳＥＢａｎｄａｌ.Ｒｅｌａｘｉｎｉｍｐａｉｒｓｒｅｃｅｐｔｏｒ

ｏｕｔｗａｒｄ(收稿日期Ｊꎬ２０１８ꎬ３２:６２９３￣６３０４.

:２０１９－０５－１６)